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NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產地：進口、國產

貨號：BK-G63290

發(fā)布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-11-22

發(fā)送咨詢信息

產品詳請

產地	進口、國產
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63290
用途	產品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態(tài)	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態(tài)	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規(guī)格	100ul10 100ul50
純度	%
是否進口	是

規(guī)格參數：

產品名稱：NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細胞
規(guī)格：100ul*10 100ul*50
分類：表達感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

章胺鹽酸鹽；正辛弗林DL-Octopamine HCl質量規(guī)格：>98% 小鼠(INS)ELISA試劑盒，英文名： INS ELISA Kit ELISAKitPⅠCP豬Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格：48T/96T

舒林酸Sulindac質量規(guī)格：>98%,BR 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測試劑盒Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T Humancysteinylleukoienes，CysLTsELISAKit人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

舒林酸(標準品)Sulindac質量規(guī)格：>98%,標準品人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒組裝/原裝

托品酸(標準品)Tropic acid質量規(guī)格：>98% Ratbetacellulin,BTCELISAKit大鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 小鼠脂聯素(ADP)試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit

小鼠轉化生長因子β(TGFβ1)ELISA試劑盒，英文名： TGFβ1 ELISA Kit 572-31-6黃杞苷說明書 Engeletin

小鼠糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T 21967-41-9黃芩苷品牌 Baicalin

人抗SS-B/La抗體試劑盒 Human SS-B/La Aibody,ELISA Kit 491-67-8黃芩素規(guī)格 Baicalein

Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 860-79-7黃楊堿 Cyclovirobuxin D

載玻片細胞IL蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 140360-29-8灰氈毛忍冬皂苷甲說明書 Macranthoidin A

568-72-9丹參酮IIA Tanshinone IIA 豬血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit

56725-99-6淫羊藿苷I規(guī)格 Icarisid I 豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

5610-40-2一葉萩堿規(guī)格 Securinine 豬調節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Porcine thrombomodulin,TM ELISA Kit

NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細胞55916-51-3重樓皂苷VI規(guī)格 Polyphyllin VI 豬素A2(TXA2)試劑盒 Pig Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit

5578-73-4血根堿規(guī)格 Sanguinarine 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit

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