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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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EPI300 電擊感受態(tài)細(xì)胞
起訂量 (瓶)價(jià)格
1-10￥2350 /瓶
≥10￥1250 /瓶
  • 品牌：帛科
  • 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào)：BK-G63255
  • 發(fā)布日期： 2021-02-21
  • 更新日期： 2024-11-21
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) BK-G63255
用途 產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞形態(tài) 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
是否是腫瘤細(xì)胞 否
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
器官來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
免疫類(lèi)型 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
品系 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)狀態(tài) 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
物種來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
包裝規(guī)格 50ul*5 50ul*20
純度 %
是否進(jìn)口 是

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱(chēng)：EPI300 電擊感受態(tài)細(xì)胞
規(guī)格 ：50ul*5 50ul*20
分類(lèi)：克隆感受態(tài)細(xì)胞
用途：生化試劑（用于科研試驗(yàn)研究）
儲(chǔ)存條件: -70℃保存，必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個(gè)月。
外觀:（性狀） 干冰運(yùn)輸，單加10kg干冰費(fèi)
單位: 袋

注意事項(xiàng)：


1. 感受態(tài)細(xì)胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細(xì)胞，用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化（陽(yáng)性對(duì)照）能長(zhǎng)出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，卻一個(gè)菌都沒(méi)長(zhǎng)出來(lái)，重復(fù)了三次都這樣。請(qǐng)問(wèn)這是感受態(tài)細(xì)胞的制作不過(guò)關(guān)，還是連接出了問(wèn)題？哪個(gè)可能性大些？
答：應(yīng)該是連接的問(wèn)題。所有連接反應(yīng)建議同時(shí)轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個(gè)陰性對(duì)照，確定酶切是否完全。同時(shí)連接前請(qǐng)確定質(zhì)粒和片段濃度達(dá)到最小連接量的要求。
感受態(tài)細(xì)胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來(lái)轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎？
答：如-80冰箱儲(chǔ)存過(guò)程中沒(méi)有發(fā)生凍融的情況，是可以用來(lái)轉(zhuǎn)化的，但是由于凍存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，轉(zhuǎn)化效率會(huì)有所下降，如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請(qǐng)選用較為新鮮的感受態(tài)細(xì)胞。

重樓皂苷VII（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Polyphyllin VII  humansnailhomolog2,SNAI2ELISAKit人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： ai-Q-Ab ELISA Kit

豬去氧膽酸質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BRHyodeoxycholic acid  小鼠白介素16(IL16)ELISA試劑盒 ，英文名： IL16 ELISA Kit  RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Hyodeoxycholic acid  人組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒humanHistamine,HISELISAKIT 96T/48T  Humangolgiprotein73,GP-73ELISA試劑盒人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

制霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Nystatin  大鼠金屬硫蛋白2(MT-2)試劑盒 Rat Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit  HumanLactateDehydrogenase，LDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒大鼠游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  34221-41-5刺甘草查爾酮品牌  Echinatin

小鼠組胺H4受體(HRH4)ELISA試劑盒 ，英文名： HRH4 ELISA Kit  94356-26-0曲札茋苷規(guī)格  3,5,3’,4’-trihydroxy-stilbene -3’-b-D-glucoside

山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測(cè)試劑盒GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  30197-14-9去氧土大黃苷  Deoxyrhapontin

犬素B2(TXB2)試劑盒 Canine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit  510-30-5刺囊酸說(shuō)明書(shū)  Echinocystic acid

英文名稱(chēng)Mouse15-lipoxygenaseELISAKit小鼠15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格：96T/48T  114902-16-8刺五加皂甙B品牌  Ciwujianoside B

76-66-4鉤藤堿品牌  Rhyncholphylline   組織1脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

76475-17-7Croverin規(guī)格  Croverin   組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

76474-56-1二氫姜黃素品牌  DihydrocurcuMin   組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

76296-75-8重樓皂苷VII品牌  Polyphyllin VII  組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

76296-72-5重樓皂苷II  Polyphyllin II  組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

EPI300 電擊感受態(tài)細(xì)胞操作方法：

1. DH5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

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