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Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)

貨號：BK-G63287

發(fā)布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-11-22

發(fā)送咨詢信息

產(chǎn)品詳請

產(chǎn)地	進口、國產(chǎn)
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63287
用途	產(chǎn)品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態(tài)	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質(zhì)期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態(tài)	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規(guī)格	100ul10 100ul50
純度	%
是否進口	是

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞
規(guī)格：100ul*10 100ul*50
分類：表達感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項：

1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，卻一個菌都沒長出來，重復(fù)了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關(guān)，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應(yīng)該是連接的問題。所有連接反應(yīng)建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉(zhuǎn)化的，但是由于凍存時間過長，轉(zhuǎn)化效率會有所下降，如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。

長春西?。藴势罚┵|(zhì)量規(guī)格：含量測定Vinpocetine 英文名稱RatCD23ELISAKit大鼠CD23規(guī)格：96T/48T 大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒，英文名： TAP ELISA Kit

枸櫞酸鉍雷尼替?。藴势罚┵|(zhì)量規(guī)格：供檢查用Ranitidine bismuth 可溶性植物葉綠體總蛋白制備試劑盒20 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISAKit 96T/48T

丹曲林鈉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Dantrolene hemiheptahydrate ELISAKitSMM人平滑肌肌球蛋白規(guī)格：48T/96T 大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)試劑盒 Rat α2 macroglobulin,α2 MG ELISA Kit

呱西替柳（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Guacetisal 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒，英文名： α1-AGP ELISA Kit CLIAKitforST1(HumanSomelysin-1)ELISAKit人基質(zhì)裂解素規(guī)格：48T/96T

RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 28649-60-7環(huán)氧續(xù)隨子醇品牌 Epoxylathyrol

載玻片細胞IGF蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 6873-13-8黃柏堿規(guī)格 Phellodendrine

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1，1BACE1ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 751-03-1黃柏酮 Obacunone

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒，英文名： TGF-β1 ELISA Kit 40246-10-4黃豆黃苷說明書 Glycitin

小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T 40957-83-3黃豆黃素品牌 Glycitein

57-87-4甾醇 Ergosterol 豬樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒 Porcine IGFBP-3 ELISA Kit

578-74-5芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷品牌 Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside 豬樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T

57817-89-7甜菊苷 Stevioside 豬樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒 Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit

574-84-5秦皮素 Fraxetin 豬樣生長因子2(IGF-2)試劑盒 Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit

57420-46-9胡麻屬苷品牌 Sesamoside 豬樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T

Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞操作方法：

1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

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