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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P64637
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-21
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P64637
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒

50

BK-P64637

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,43,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細胞瘤細胞,P815細胞 INS-1細胞,大鼠胰島素細胞去甲基雷諾嗪Desmethyl Ranolazine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP雷諾嗪-d3Ranolazine-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口

STIM1 Others Human  STIM1 / GOK 細胞裂解液 (陽性對照) 雷諾嗪Ranolazine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 ×105(1ml)去甲基雷諾嗪β-D-葡萄糖苷酸Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口

EPHB1 Others Human  EPHB1 / EPHT2 細胞裂解液 (陽性對照) (R)-鹽酸樂卡地平(R)-Lercanidipine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
海馬神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Hexadecane質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)

PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 細胞裂解液 (陽性對照) 正十六烷(分析標準品,99.5%(GC))Hexadecane質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%(GC)

大鼠內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-萘磺酸鈉(>98%,BR)-2-naphthalenesolfonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞細胞 RBL-2H3 rat neuophils alkaline cell leukemia MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+15%熱滅活FBS司班20Span* 20質(zhì)量規(guī)格:BR

IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (His 標簽)全染色劑(>95%,BS)Stains-All質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS
上皮細胞生長添加物MEpiCGS羥基脲Hydroxyurea/Hydroxycarbamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

MAP2K6 Others Human  MKK6 / MEK6 / MAP2K6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥基脲(標準品)Hydroxyurea/Hydroxycarbamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

Butt瘤細胞;RAJI枸櫞酸托瑞米芬Toremifene 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

MFC細胞,細胞 綠色熒光蛋白標記細胞,MGC803-GFP細胞 恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]枸櫞酸托瑞米芬Toremifene 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

大鼠細胞;GH3枸櫞酸托瑞米芬(標準品)Toremifene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
恒河猴皮膚細胞;RM-S1 細胞,LoVo細胞 TE-1(細胞)3,5-二甲氧基芐溴(>96.0%(GC))3,5-Dimethoxybenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)

癌細胞;MCF 7B3,5-二溴-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC))3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 細胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二水楊酸鋰(>98%,BC)Lithium 3,5-diiodosalicylate質(zhì)量規(guī)格:>98%BC

恒河猴腎細胞;RM-1無水溴化鋰(>98%,BR)Lithium bromide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

AMPK Others Human  AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1酸鋰(>98%,BR)Lithium metaphosphate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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