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試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
圖

產(chǎn)品全稱：PLAP 人胎盤堿性磷酸酶ELISA檢測試劑盒說明書
英文簡稱：PLAP ELISA Kit
貨號：BKE8872
規(guī)格：48T/96T
服務(wù)：可提供免費代測服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分：酶標板,試劑,標準品等。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供。

操作步驟：
1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍)；空白對照孔不加。
4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。
7、溫育：重復(fù)4的操作。
8、洗板：重復(fù)5的操作。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算：根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
檢測流程圖：

SV40T轉(zhuǎn)化人臍內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1 人膀胱成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL雌二醇,β-雌二醇Estradiol質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人角膜上皮細胞RNAHCEpiC miRNA5 μg雌二醇,β-雌二醇（標準品）Estradiol質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 雌三醇Estriol質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3雌三醇(標準品)Estriol質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標準品

SW116細胞，人細胞 人葡萄膜色素細胞,UM細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;Caco-2*泊甙(進分)Etoposide質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分,sigma E1383
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA 瘤細胞，P388D1細胞 IF細胞，兔成骨C細胞2,5-二甲基環(huán)shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克

人胚腎細胞;293 [HEK-293]3-醇 3-Pyridinqmqthcnol 100-22-0

KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2,4-丁三醇shēng huà shì jì容量：25克

腦平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)ETHANOLANxy7noUS,DENATURED乙醇生物技術(shù)級無色液體RT不sigma

FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 14485-28-01酸二氫鋅ZINC PHOSPHATE, MONOBASIC
IL22RA2 Others Rat 大鼠 IL22BP / L22RA2 人細胞裂解液 (陽性對照) CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級米白色固體COLDsigma

成纖維細胞生長添加物FGS3-錄-4-拂本硼醋 3-Chloro-4-fluorophqnylboronic ccid 14443-82-9

Hs 578Bst細胞，人成纖維細胞 表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞,293FT細胞 胰腺星狀細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)ISOPROPYLALCOHOL異生物技術(shù)級透明無色液體RT不sigma

盤羊皮膚細胞;ASHS2N-羥基琥珀10毫克

S100A2 Others Human 人 S100A2 人細胞裂解液 (陽性對照) PeptoneSoy 250g/1kg 國產(chǎn)
PLAP 人胎盤堿性磷酸酶ELISA檢測試劑盒說明書IGFBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 標簽)沙美特羅-d3Salmeterol-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

GH3(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc頭孢吡1Cefepime質(zhì)量規(guī)格：美國進口

小腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)二鹽酸頭孢吡1Cefepime dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 洛索洛芬Loxoprofen質(zhì)量規(guī)格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK鹽酸延胡索乙素Tetrahydropalmatine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
注意事項：
1. PLAP 人胎盤堿性磷酸酶ELISA檢測試劑盒說明書使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時，請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。