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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4558 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | BKP4558 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
cis-Octahydro-isoindole 中文名： 分子式：C8H15N 度：98.0% 小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Benzylsuccinic acid 中文名： 分子式：C11H12O4 度：98.0% 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid 中文名： 分子式：C17H23NO5 度：98.0% 小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Atorvastatin calcium 中文名：阿托伐他汀鈣 分子式：C33H35FN2O5 度：98.0% 小鼠1,4,5-三0酸肌醇（IP3）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester 中文名： 分子式：C11H15NO3 度：98.0% 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠β甘露糖苷酶elisa試劑盒 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Ketoprofen 22071-15-4 中文名：酮基布洛芬 分子式：C16H14O3
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bisoprolol fumarate 中文名：富馬酸比索洛爾 分子式：C22H35NO8 度：98.0%
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bis(4-hydroxy-3,5-dimethylphenyl) sulfone 中文名：雙(4-羥基-3,5-二甲苯基)砜 分子式：C16H18O4S 度：98.0%
小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit ELISA. 96T/48T N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole 中文名： 分子式：C16H21N3O4S
小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bisphenol P 中文名：雙酚P 分子式：C24H26O2
病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHUASMC cDNAD-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.99D-Alanine tert-Butyl Ester Hydrochloride
V79細(xì)胞，中國倉鼠肺細(xì)胞 人亞歷山大細(xì)胞系,PLC/PRF/5細(xì)胞 膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-精氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98D-Arginine
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1D-核糖-5-1酸二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>85%,D-Ribose 5-phosphate di salt hydrate
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 蘇木色精，蘇木素質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分Hematoxylin
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2亞甲基二水楊酸(異構(gòu)體的混合物)(>90.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化) 細(xì)胞，BEL-7402細(xì)胞 D3細(xì)胞，129小鼠ES細(xì)胞2-氨基-2',5-二氯二苯甲酮(>98.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone
MiaPaCa-2, 人細(xì)胞 Human4-1丙氧基-2-羥基二苯甲酮(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone
CST4 Others Human 人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(T)3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride
人無色素睫狀上皮細(xì)胞 cDNAHNPCEpiC cDNA10-去乙酰巴卡丁III質(zhì)量規(guī)格：10-Deacetylbaccatin-III
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
