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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4522
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4522
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書

Vibrio campbelliiPCR

BKP4522

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

Bupivacaine   18010-40-7  中文名:鹽酸布比卡因  分子式:C18H29ClN2O  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Buergerinin G  263764-83-6  中文名:  分子式:C9H12O4  度:關(guān)鍵詞:  北玄參; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠酶(CA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Bromhexine   611-75-6  中文名:鹽酸溴己新  分子式:C14H21Br2ClN2  度:98.0%      小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Brinzolamide  138890-62-7  中文名:布林佐胺  分子式:C12H21N3O5S3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠胃動素(MTL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Bortezomib  179324-69-7  中文名:硼替佐米  分子式:C19H25BN4O4  度:98.0%      小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Clevidipine butyrate  中文名:丁酸氯維地平  分子式:C21H23Cl2NO6  度:98.0%

小鼠Ⅰ型膠原C端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Benzanthrone  1982/5/3  中文名:苯并蒽酮  分子式:C17H10O  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Deoxyneocryptotanshinone  中文名:  分子式:C19H22O3 

小鼠Ⅰ型膠原(Col)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Loxoprofen  中文名:洛索洛芬  分子式:C15H18O3 

小鼠8異素elisa試劑盒   小鼠8異素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠8異素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8異素試劑盒、小鼠8異素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Benzanthrone  1982/5/3  中文名:苯并蒽酮  分子式:C17H10O
坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書HFF-1(人成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(S,S)-(+)-2,3-Butanediol

hMoCD14+-PB single donorPellet 人類外周血CD14+單核細(xì)胞團(tuán)塊單一來源,超 > 1 mio.cells 人腦微內(nèi)皮細(xì)胞RNAHBMEC miRNA5 μg(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)(-)-Camphanic Acid

CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Picfeltarraenin IV

ENPP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 ENPP3 / CD203c 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瓜子金皂苷XXXI(對照品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Polygalasaponin XXXI

神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM俾斯麥棕R質(zhì)量規(guī)格:BSBismarck Brown R
CADM3 Others Mouse
小鼠 CADM3 / IGSF4B / NECL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 3-1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 3'-monophosphate  salt

腎皮層上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)腺苷 3',5'-1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 3',5'-diphosphate  salt

NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 2',5'-1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 2',5'-diphosphate  salt

大鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL腺苷5'-O-硫一1酸二鋰鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 5'-O-thiomonophosphate dilithium salt

MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B細(xì)胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSα-酮戊二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品2-Ketoglutaric acid
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。


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