產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4502 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
錐蟲通用PCR檢測試劑盒說明書 | Trypanosoma spp.PCR | BKP4502 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:錐蟲通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Betaxolol 中文名:鹽酸倍他洛爾 分子式:C18H30ClNO3 度:98.0% 豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ciprofloxacin 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3 度:98.0% 豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Lincomycin 中文名:鹽酸林可霉素 分子式:C18H35ClN2O6S 度:98.0% 豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Diphenhydramine 中文名:鹽酸苯海拉明 分子式:C17H22ClNO 度:98.0% 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O 度:98.0% 豚鼠端粒酶(TE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
纖維素酶(CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 3-Aminoadamantan-1-ol 中文名: 分子式:C10H17NO
纖維蛋白原(FIB)測試盒(半自動凝血儀) Rifampicin 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12
纖維蛋白原 (Fibrinogen) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Atorvastatin calcium 134523-03-8 中文名:阿托伐他汀鈣 分子式:C33H35FN2O5 度:98.0% 關鍵詞:
纖溶酶原激活劑抑制因子2 英文名稱: Human Plasminogen Activator Inhibitor 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAI2 Aspirin 50-78-2 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4
纖溶酶原激活劑抑制因子1 英文名稱: Human Plasminogen Activator Inhibitor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAI-1 Aspirin 50-78-2 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4 度:99.0%
錐蟲通用PCR檢測試劑盒說明書HPrSMC Pellet 人類平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人星形膠質(zhì)細胞cDNAHA cDNA芝麻素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BRSesamin
CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2芝麻素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Sesamin
KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細胞裂解液 (陽性對照) 槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside
人表皮色素細胞-淺色素裂解物HELM-l L知母皂苷A3(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC(ELSD)>97%,標準品Timosaponin A3
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE 人細胞,SW579細胞 RIN-m5F細胞,小鼠β瘤細胞正十五烷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標N-PENTADECANE
人前脂肪細胞-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級白色粉末RTsigma
ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二苯基 Diphenylcarbinol,99% 91-01-0 25G 通用試劑
長尾綠猴胚胎細胞;4179碳醋胍;碳醋亞安脲;胍碳醋鹽 Gucnidinq ccronctq 293-82-1
HL-7702細胞,肝細胞 人腺癌細胞,LS180細胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術級液體FROZENsigma
大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]577-11-7多庫酯鈉Docusate wo7ium
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。