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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4498 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 克氏錐蟲PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Trypanosoma cruziPCR
【貨號】: BKP4498
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
克氏錐蟲PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Benzyl L-(+)-mandelate 62173-99-3 中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯 分子式：C15H14O3 成纖維生長因子-4 英文名稱： fibroblast growth factor 4 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： FGF-4
N-Benzoyl-leucine 17966-67-5 中文名：N-苯甲酰基-亮氨酸 分子式：3 成纖維生長因子-4 英文名稱： fibroblast growth factor 4 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： FGF-4
N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名：N6-苯甲?；汆堰?/span> 分子式：C12H9N5O 素 英文名稱： Human Renin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： RN
Betamipron 3440-28-6 中文名：倍他米隆 分子式：C10H11NO3 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1 英文名稱： Human Retinoblastoma Protein 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： RBP1
6-Benzyloxypurine 57500-07-9 中文名：6-芐氧基嘌呤 分子式：C12H10N4O 松弛素-2 英文名稱： Human Relaxin-2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： RLN-2
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次 2-Amino-3-Formylchromone 中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮 分子式：C10H7NO3 度：98.0%
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 度：98.0%
細(xì)菌乙醇比色法定量檢測試劑盒20次 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式：C2H3N3S2 度：98.0%
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳 2-Amino-6-chloropurine 中文名：2-氨基-6-氯嘌呤 分子式：C5H4ClN5 度：98.0%
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳 2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 度：99.0% 關(guān)鍵詞：
克氏錐蟲PCR檢測試劑盒說明書Hs 578T人癌細(xì)胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS琥珀酸；丁二酸質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%Succinic acid
ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)琥珀酸；丁二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Succinic acid
人胚;MRC-5 QBC-939, 人細(xì)胞 Humanα-乳香酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品alpha-Boswellic acid
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1野馬追內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Eupalinolide A
SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 紅霉素C質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Erythromycin C
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基25克2～8℃，避光
人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A腺苷;;;腺速苷;胰苷;腺呤配糖;腺尿環(huán)核苷 cdqnosinq 28-61-7
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙[三(羥甲基)]基... BIS-TRIS (cell culture tested, ≥98%) 6976-37-0 25G 通用試劑
CoC2(懸浮) BENZALKONIUMCHLORIDE,50%SOLUTION本扎錄，50%溶液美國國家處方集級白色至淡黃色粘稠液體RT不sigma
COLO 205人細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBSFicoll400 10g/25g Pharmacia分裝
PCR檢測試劑盒：
克氏錐蟲PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
