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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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D型病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63265
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-16
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63265
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口


實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

D型病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63265

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,54,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

四甲基化銨 100g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5 中文名:4,4'-(2-苯并惡唑基) 分子式:C28H18N2O2 度:98.0%

水質(zhì)檢測儀、比色計試劑 Water quality detector, colorimeic reage  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  6317-56-2 中文名: 分子式:C13H12OS 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

水質(zhì)讀卡儀器 Water quality reading card insume  4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  519-98-2 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0% 關(guān)鍵詞:

水硬度快速測試盒 Water hardness rapid test case α-Spinasterol glucoside  1745-36-4 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 度:97.0% 關(guān)鍵詞: ; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

水樣中六價鉻離子(Cr6+)濃度測試盒 可見分光光度法 50/48 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  147118-37-4 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 MouseD-氨基葡萄糖鹽酸鹽D-Glucosamine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 細胞裂解液 (陽性對照) 奧卡西平Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR

細胞;SMMC-7721奧卡西平(標準品)Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

3. 毛發(fā)細胞系統(tǒng)金絲桃素(標準品)Hypericin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

小鼠神經(jīng)干細胞D-葡萄糖-6-1D-+-Glucopyranose 6-phosphate質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝
BxPC-3, 原位*腺癌細胞株米帕明/丙咪嗪(標準品)Clomipramine HCL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

急性早幼粒細胞;HL-60 大鼠上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸氫氯吡格雷 IClopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,I

原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml硫酸氫氯吡格雷 II(標準品)Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品

FAS Others Cynomolgus 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸氫氯吡格雷 IIClopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:含量97.0%-101.5%,II

D型病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24萘丁美酮/萘普酮Nabumetone質(zhì)量規(guī)格:>99%
Prosapogenin A  中文名:薯蕷次皂苷A 分子式:C39H62O12 度:% 兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 兔熱休克蛋白70試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔熱休克蛋白70試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 保存條件:2-8 保質(zhì)期:6個月。

2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名: 分子式:C46H72O17 度:% 兔熱休克蛋白40elisa試劑盒 兔熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 elisa試劑盒 保存條件:2-8 保質(zhì)期:6個月。

Dehydroepiandrosterone  中文名:脫氫表雄酮 分子式:C19H28O2 度:99.0% 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Gracillin  中文名:纖細薯蕷皂苷 分子式:C45H72O17 度:98.0% 兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名: 分子式:C56H90O19 度:97.5% 兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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