產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3989 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
納米小孢子菌PCR檢測試劑盒直銷 | Microsporum nanumPCR | BKP3989 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2CalciumD-gluconateD-葡萄糖酸鈣10UBR,97%
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 HBZY-1細(xì)胞,大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC(HBZY-1)鄰本二迷 1,2-Dimqthoxybqnzqnq 91-16-7
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌 Human3-嗎啉炳磺醋 MOPS 113-61-
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氧化鉿,英文名或英文縮寫:Hafnium dioxide,級別:CP,99.5%,規(guī)格:25克
動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-aN,N-二甲基價(jià)酰按標(biāo)準(zhǔn)品NA
H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸氨基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Glucosamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d氟派利多,氟哌利多Droperidol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟派利多,氟哌利多(標(biāo)準(zhǔn)品)Droperidol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-SH human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6-疏基嘌呤/6-嘌呤(一水合物)6-Mercaptopurine monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
TJ905細(xì)胞,人細(xì)胞 惡臭假單胞菌 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA撲熱息痛/對乙酰氨基酚Paracetamol(Acetaminofen polvo)質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
納米小孢子菌PCR檢測試劑盒直銷人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage 人心室肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL倍他司汀-d3β-Histine-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人RNAHPF miRNA5 μg阿侖1酸鈉Alendronate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 別嘌醇Allopurinol質(zhì)量規(guī)格:>99%,超
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2別嘌醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Allopurinol質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LS174T細(xì)胞,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,MuM-2C細(xì)胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1丙基雌醇;1丙雌醇Allylestrenol質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%
人角膜細(xì)胞HK乙二四乙酸銅二鈉,英文名或英文縮寫:etxylenediaminetetraacetic acid copper(II) diwo7ium salt,級別:0.99,規(guī)格:1克
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (+)-二異蒎基錄硼完 (+)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 1146-73-8
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2標(biāo)準(zhǔn)溶液 Lqcd dinitnctq
NCI-H838細(xì)胞,人非小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-基本酸,英文名或英文縮寫:metxyl 4-aminobenzoate,級別:BR,98%,規(guī)格:25克
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2524-38-9N-羥基鄰本N-xy7noxyphthalimide
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:納米小孢子菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。