產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4455 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Transmissible Gastroenteritis Virus(TGEV)RTPCR | BKP4455 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Arbidol 131707-23-8 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S Human pulmonary surfacta associated protein B (SP-B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒
Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid 147027-10-9 中文名: 分子式:C18H27N3O4S rabbittelomerase,TEELISAKit 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 144809-28-9 中文名: 分子式:C19H18N2O3S CLIAKitforBDNF(MouseBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T
Leflunomide 75706-12-6 中文名:來氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 細(xì)菌總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Lafutidine 118288-08-7 中文名:拉呋替丁 分子式:C22H29N3O4S RabbitD-Dimer,D2DELISAKit兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名: 分子式:C10H14N2O6S3 度:98.0%
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adynerigenin β-neritrioside 88721-09-9 中文名: 分子式:C42H64O17
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate 340702-68-3 中文名: 分子式:C50H93NO9 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adrenosterone 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0%
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Proline benzyl ester hydrochloride
NCI-H524(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍內(nèi)皮細(xì)胞)L-精氨酸-L-谷氨酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine L-glutamate
CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽(2:1)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine AKG 2:1
CS Others Human 人 Ciate syhase / CS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸-5-甲酯質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Glutamic acid 5-methyl ester
人腸平滑肌細(xì)胞總RNAHISMC NAN-乙酰-L-亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%N-Acetyl-L-leucine
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,5-二溴硒酚(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,5-Dibromoselenophene
人小腦顆粒細(xì)胞cDNAHCGC cDNA2,6-二溴萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,6-Dibromonaphthalene
CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene
Ana-1 小鼠巨噬細(xì)胞6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)6,12-Dibromochrysene
CL-0198RM-1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×22',3'-二脫氧尿苷(ddU)質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分2',3'-Dideoxyuridine
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。