產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4214 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬嵴病毒庫(kù)布病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Porcine kobuvirus(PKV)()RTPCR | BKP4214 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:豬嵴病毒庫(kù)布病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0% 兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO 度:98.0% 兔子壞死因子α(TNF-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 度:98.0% 兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒 兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO 度:98.0% 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)elisa試劑盒 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)試劑盒、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Pitavastatin ethyl ester 中文名: 分子式:C27H28FNO4 度:98.0% 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3elisa試劑盒 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體 英文名稱: Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): sCD40L Dihydrosenkyunolide C 195142-72-4 中文名:二氫洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H14O3
可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1 英文名稱: soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): sEM-1 Pazufloxacin mesilate 中文名:甲磺酸帕珠沙星 分子式:C17H19FN2O7S
可溶性白細(xì)胞抗原G 英文名稱: soluble leukocyte aigen G 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): sHLA-G Norethindrone 中文名:炔諾酮 分子式:C20H26O2
可溶性白細(xì)胞抗原 G5(sHLA-G5) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Norfloxacin 70458-96-7 中文名:諾氟沙星 分子式:C16H18FN3O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
可溶性白細(xì)胞抗原 G(sHLA-G) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Norfloxacin 中文名:諾氟沙星 分子式:C16H18FN3O3
豬嵴病毒庫(kù)布病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)TMUB2 Others Human 人 TMUB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴藍(lán)鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeBromochlorophenol blue salt
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml溴酚藍(lán)鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:BS GradeBromophenol blue, salt
D341 Med細(xì)胞,人髓母細(xì)胞瘤 人癌細(xì)胞,BCaP-37細(xì)胞 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM-prf吡嗪酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Pyrazinamide
婆羅門(mén)牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,BRDemeclocycline hydrochloride
IL2RA Others Human 人 IL2Ra / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品Demeclocycline hydrochloride
盤(pán)羊皮膚細(xì)胞;OAM-S13-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口3-Hydroxy Desloratadine
DLD-1細(xì)胞,人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Y79細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30地氯雷他定-d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Desloratadine-d4
HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23-羥基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奧司他韋酸-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Oseltamivir-d3 Acid
人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪質(zhì)量規(guī)格:>98%6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine