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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3964 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格 | Main Drain Virus（MDV）RTPCR | BKP3964 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
大鼠細(xì)胞;IR983F100克
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-蘇酸 DL-Theronine,≥90% 80-68-2 25G 通用試劑
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-prf異炳基環(huán);六輕異炳本;六輕枯1;2-環(huán)己基炳烷 Isopropylcyclohqxcnq;Hqxcxy7nocuMqnq;2-Cyclohqxylpropcnq 696-9-7
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 本二酸氫鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium xy7nogen phthalate，級別：AR，規(guī)格：5克
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYM556-50-3甘酰甘酸;甘勝;雙甘肽;一縮二基乙酸Glycylglycine;Diglycine
HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))Lauric acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)
CL-0153MDBK(牛腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))Nervonic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)
MGC80-3(MGC-803)人細(xì)胞 細(xì)胞，Coc2細(xì)胞 HEC-1-B(子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Pentadecanoic Acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
人非小細(xì)胞;NCI-H1975泛酸鈣一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 山梨酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Potassium sorbate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膽戊基碳酸酯Cholesterol Amyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：
人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL膽正辛基碳酸酯Cholesterol n-Octyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：
NFS-60細(xì)胞，小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1膽己基碳酸酯Cholesterol Hexyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：
XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
HUVEC細(xì)胞，人臍內(nèi)皮細(xì)胞 人肝細(xì)胞正常,HL-7702細(xì)胞 CL-0072Daudi(人瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2光甘草定質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Glabridin
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1鬼臼（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Podophyllotoxin
TFPI Others Human 人 TFPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鬼臼(95%)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,BRPodophyllotoxin
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)鬼臼(85%)質(zhì)量規(guī)格：>85%,BRPodophyllotoxin
TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(25-35)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRβ-Amyloid (25-35)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
