產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3962 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Madurella spp.PCR
【貨號】: BKP3962
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
非洲綠猴腎細胞;Vero E63,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR
人腎近端小管上皮細胞(HRPTEpiC)膠原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2
CL-0203SCaBER(人膀胱鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2ProteinprotectantTY蛋白保護劑TY1克生物技術級,200u/mg
人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1 大鼠腦微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2′-脫氧胞嘧啶核苷鹽酸,英文名或英文縮寫:2′-dCoHC1,級別:BR,98%,規(guī)格:HC5000u
P815 小鼠肥大細胞癌細胞54897-59-5DL-2,3-二基酸鹽酸鹽DL-2,3-DIAMINOPROPIONIC ACID MONOxy7noCHLORIDE
HFL-I細胞,人胚 鼠肌原細胞,C2C12細胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸氟西?。藴势罚?/span>Fluoxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2馬來酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2007
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)馬來酸氟伏沙明(標準品)Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
原代細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml福美斯坦Formestane質(zhì)量規(guī)格:>99%
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 福美斯坦(標準品)Formestane質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL甘羅溴銨(標準品)Glycopyrrolate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 Human安倍生坦Ambrisentan質(zhì)量規(guī)格:>98%
CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人細胞裂解液 (陽性對照) 安倍生坦(標準品)Ambrisentan質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
人肺鱗癌細胞;NCI-H520鹽酸決奈達隆Dronedarone HCL質(zhì)量規(guī)格:>99%,鹽酸鹽
GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人細胞裂解液 (陽性對照) 決奈達隆(標準品)Dronedarone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒說明書人脊髓星形膠質(zhì)細胞總RNAHA-sp NA叔丁基對本二酚,英文名或英文縮寫:TBHQ,級別:BR,規(guī)格:25克
PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硼醋銨;硼醋輕銨;偏硼醋銨;四硼醋銨 cMMoniuM borctq;cMMoniuM Mqtc-borctq;cMMoniuM tqtrcborctq 18-87-4
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1二丁基流迷 96% Dibutyl sulfidq 244-40-1
BEL-7402細胞,細胞 人口腔表皮樣癌細胞,KB細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2脂嶙壁酸shēng huà shì jì容量:5毫克
C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMABrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820
PCR檢測試劑盒
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。