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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP3954
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP3954
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書

Lymphocytic Choriomeningitis  Virus(LCMV)RTPCR

BKP3954

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
肺平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%魚明膠阻斷試劑蛋白組學(xué)級(jí)琥珀色至淺棕色液體COLDsigma

SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) β-葡萄糖苷酶 杏仁 (+4) BqTc-GLUCOSIDcSq 9001--3

人細(xì)胞;PC-3 [PC3]吉姆薩染料 Giemsa stain (for use as a blood stain) 51811-82-6 1G 染色劑

293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞,A9細(xì)胞 CL-0242Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甜醇,英文名或英文縮寫:Dulcitol,級(jí)別:高,98%,規(guī)格:500毫克

YAC-1(小鼠瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 國(guó)產(chǎn)
HUVE-12/CRL2480
細(xì)胞,人臍內(nèi)皮細(xì)胞 長(zhǎng)臂猿瘤,MLA-144細(xì)胞 人真皮內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDLEC NA鹽酸頭孢他美酯Cefetamet pivoxil hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:≥653μg/mg,BR

QSG-7701(人正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefetamet pivoxil hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定

EL4(小鼠瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(人色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1L-生物喋呤L-Biopterin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

雜交瘤(B);C3110D2E11渥曼青霉素Wortmannin質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國(guó)進(jìn)口,PI3K/AKT通路的抑制劑

MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 溴化新斯的明Neostigmine bromide質(zhì)量規(guī)格:>98%
淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書HCT-8/VCR細(xì)胞,耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞系 人色素瘤細(xì)胞,HME6細(xì)胞 表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB杯莧甾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyasterone質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

H4() 5×106cells/瓶×2四氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetrahydroberberine,THB質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CD274 Others Human PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 通關(guān)藤苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenacissoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人肝臟星形細(xì)胞總RNAHHSteC NA通關(guān)藤苷G(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenacissoside G質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 白花前胡丙素(標(biāo)準(zhǔn)品)Praeruptorin C質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B 人卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL乳白蛋白,英文名或英文縮寫:α-Lactalbumin,級(jí)別:BR50u/mg,規(guī)格:1

人神經(jīng)束膜細(xì)胞RNAHPC miRNA5 μg1,1,2-三錄烷 1,1,2-Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;β-Trichloroqthcnq 79-00-2

ACOX1 Others Human ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 麥芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020-36-6

兔源細(xì)胞甲基本基酮,英文名或英文縮寫:Acetopxenone,級(jí)別:色標(biāo),99%,規(guī)格:100

AsPC-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 CoC1細(xì)胞耐藥亞株,CoC1/DDP細(xì)胞 人非小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H232133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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