|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3953 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
長須白蛉PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Lutzomyia longipalpisPCR | BKP3953 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：長須白蛉PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)細(xì)胞Anisomycin回香霉素500U高，98%
COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,2,4-本三酚 99% 1,2,4-Bqnzqnqtriol 233-73-3
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76言醋米托醌 (HPLC) Mitoxcntronq 6271-80-9
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) ABTSsubstrateliquid2,2′-聯(lián)-雙(3-乙基本并噻唑啉-6-磺酸)鹽底物25克AR，60%
胎兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)145069-56-3Fmoc-鏈接劑4-[(2,4-Dimetxoxypxenyl)(Fmoc-amino)metxyl]pxenoxyacetic acid
IB3 Others Human 人 IB3 / B3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸酪胺Tyramine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYM糠酸(>97%，BR)2-Furoic acid質(zhì)量規(guī)格：>97%，BR
A3細(xì)胞，細(xì)胞細(xì)胞 5-8轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系,F2-2細(xì)胞 CL-0330COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-甲基咪唑(>98%,BR)2-Methylimidazole質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF6-氯嘌呤(>98%,BR)6-Chloropurine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Big CHAP(>98%，BR)Big CHAP質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
長須白蛉PCR檢測(cè)試劑盒直銷CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸阿米洛利雜質(zhì)（4-氨基-6-氯-1，3-苯基二硫酰胺）（標(biāo)準(zhǔn)品）4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
CM-H102細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氨基甲酰舍曲林葡萄糖苷酸Sertraline Carbamoyl Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 ,AtT20細(xì)胞 COS-7(非洲青猴腎細(xì)胞)(1S,4R)鹽酸舍曲林(1S,4R) Sertraline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317氨基他達(dá)那非Amino Tadalafil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸特拉唑嗪Terazosin hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate
Raji，人Butt's瘤細(xì)胞 Human1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate
FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate
人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[8]arene
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
