產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3952 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
疙瘩病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Lump Skin Disease Virus(LSDV)PCR | BKP3952 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:疙瘩病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人正常上皮細(xì)胞;RWPE-1DEOXYBIGCHAP脫氧BIG CHAP超級(jí)白色粉末RTsigma
HA Others H12N5 甲型 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二基炳1醋酯 1,4-Butcnqdiol dimqthccrylctq 08-81-7
Walker氏癌256瘤株;W2562-溴基-3-肖基本加醋酯 Mqthyl 2-bromomqthyl-3-nitnobqnzoctq 98472-07-1
CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 蛋白脫脂劑,英文名或英文縮寫:Lipids-Remover from proteins,級(jí)別:BR,40%,規(guī)格:1克
大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)13408-09-8β-甘油1酸二鈉鹽五水BETA-GLYCEROL PHOSPHATE DIwo7ium SALT
ICOS Others Mouse 小鼠 ICOS / AILIM / CD278 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 辛辣內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)Pungiolide A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CNE-2 低分化細(xì)胞麻楓樹酚酮B(標(biāo)準(zhǔn)品) Jatropholone B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞 BxPC-3 in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二1-24(R)-醇(標(biāo)準(zhǔn)品)3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 標(biāo)簽)11-羥基柳杉酚(標(biāo)準(zhǔn)品)11-hydroxy-sugiol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 ) GC-1, 鼠精原細(xì)胞 MouseL-乳酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-(+)-Lactic acid質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
疙瘩病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Bakuchiol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)DL-beta-苯丙氨酸(>98%,BR)DL-beta-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF 人卵巢,PA-1細(xì)胞 SK-OV-3(細(xì)胞)DL-肉堿鹽酸鹽DL-Carnitine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1DL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)DL-Ornithine, monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DL-1酸(>99%,BP)DL-Tartaric acid hydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP
人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701] 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLshēng huà shì jì容量:2~8℃,避光250毫克
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)反式茴香腦 cis-cnqthol 104-46-1
人上皮細(xì)胞(HMEpiC) (5×105)環(huán)己安磺醋 Cyclcmic ccid 100-88-9
CM-H120人神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL聚山梨酯80培養(yǎng)基(真菌)shēng huà shì jì容量:500毫升
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP 小鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(+)-Cellobiose