產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4062 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
絲狀支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書 | Mycoplasma mycoidessubsp(capri)PCR | BKP4062 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:絲狀支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)DEAE葡聚糖凝膠A-50shēng huà shì jì容量:5KU
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸 Methyl linoleate,≥99% 112-63-0 1G 通用試劑
人成細胞;MG-63肝速酶I(-20°C) HqPcRINcSq 902-39-
豚鼠心肌細胞;GP-H1 EBV 轉化的絨猴白細胞,B95-8細胞 MEL細胞,小鼠紅細胞PONCEAUS麗春紅S (猩紅S)*深紅色結晶粉末RTsigma
人胚;MRC-5587-84-8二本胺化 98%DIpxenYLAMINE SULFATE
CM-H010人小氣道上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸普魯卡因(標準品)Procaine hydrochloride質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
WM35, 人色素瘤細胞伏立諾他雜質Vorinostat impurity質量規(guī)格:>98%
人細胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠完全培養(yǎng)基 100mL當藥醇苷(標準品)Swertianolin質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml皂素(進分)saponin質量規(guī)格:進分,≥10 %
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 苦豆堿Aloperine質量規(guī)格:HPLC>95%,BR
絲狀支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書LOVE1細胞,結細胞 人色素瘤細胞,B16細胞 EB病毒轉化的人B細胞;HH-29巴馬汀氯化物一水合物(分析標準品)Palmatine chloride hydrate質量規(guī)格:分析標準品
HCC827(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2BSA[=N,O-雙(三甲基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide質量規(guī)格:>75.0%(GC)
ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照) BSTFA[=N,O-雙(三甲基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于氣相色譜)
人肝細胞;HL-7702[L-02]N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide質量規(guī)格:>95.0%(GC)
MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照) TMS-咪唑(=N-三甲基硅基咪唑)(>98.0%(T))TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)質量規(guī)格:>98.0%(T)
SW1990細胞,人細胞 人胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬質量規(guī)格:美國進口4-Acetoxy Tamoxifen
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內皮細胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)質量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)
Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內皮細胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分)質量規(guī)格:美國進口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)
人基質細胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物)質量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)
IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (1R,4R)-N-去甲基鹽酸舍曲林質量規(guī)格:美國進口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride