產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3957 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷
【英文名稱】: Macrococcus spp.PCR
【貨號(hào)】: BKP3957
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CD99 Others Mouse 小鼠 CD99 / PILR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) EDTA,0.5MSTERILESOLUTIONEDTA, 0.5M無(wú)菌溶液, pH8.0生物技術(shù)級(jí)無(wú)色至微黃色無(wú)混合液體RTsigma
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞碳醋鎘 CcdMiuM ccronctq 213-78-0
MME Others Rat 大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞油酸 (培養(yǎng)級(jí)) Linoleic acid (≥99.0%, cell culture t... 60-33-3 1G 通用試劑
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17N-叔丁氧羰基-D-色酸,英文名或英文縮寫:Nα-Boc-D-tryptophan,級(jí)別:特,98%,規(guī)格:1克
ACHN細(xì)胞,人細(xì)胞系 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,W6/32細(xì)胞 CL-0438SF767(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(L-精酸鹽酸鹽)
Hs 578T 人癌細(xì)胞蘇丹藍(lán)II/溶劑藍(lán)35Sudan Blue II/Solvent Blue 35質(zhì)量規(guī)格:BS
SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW-13 cells of small cell carcinoma of adrenal cortex L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS甲基紅Methyl red質(zhì)量規(guī)格:IND
FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)間甲基紅m-Methyl red質(zhì)量規(guī)格:IND
大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(RM)(5×105) JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 Human甲基紅鈉鹽/酸性紅2Methyl Red salt質(zhì)量規(guī)格:IND
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3西諾沙星;新惡酸Cinoxacin質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分
人細(xì)胞;SF7634,5-雙(甲硫代)-1,3-二硫醇-2-酮(>98.0%(GC))4,5-Bis(methylthio)-1,3-dithiol-2-one質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
FL62891細(xì)胞,人肝細(xì)胞 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II C3細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647二馬來(lái)腈二鈉(>90.0%(N))Di Dimercaptomaleonitrile質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(N)
Molt-4(人急性母細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25(6)-氨基熒光素5(6)-Aminofluorescein質(zhì)量規(guī)格:0.9
Promocell C-23120 Fibroblast Growth Medium 2KIT, 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型套裝 500ml5-FAM, SE;5-羧基熒光素琥珀酯5-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester質(zhì)量規(guī)格:0.9
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MSCGS5,6-FAM;5(6)-羧基熒光素5(6)-Carboxyfluorescein質(zhì)量規(guī)格:0.95
巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷人;Calu-35-IDC脫氧胞苷25克生物技術(shù)級(jí),90%
CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 一縮二炳二醇(異構(gòu)體的混合物) 1,1'-Oxydi-2-propcnol 110-98-2
CM-H102細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甘露醇 Mcnnitol 69-62-8
HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 ,AtT20細(xì)胞 COS-7(非洲青猴腎細(xì)胞)乙酸铔,英文名或英文縮寫:Ammonium acetate,級(jí)別:BR,規(guī)格:250毫克
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317letheen 培養(yǎng)基NA
PCR檢測(cè)試劑盒
巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。