產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4058 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
衣阿華支原體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 衣阿華支原體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】: Mycoplasma iowaePCR
【貨號(hào)】: BKP4058
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
衣阿華支原體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
EML2 Others Human 人 EML2 / TLT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) xy7noGENPEROXIDEACS級(jí)10MLCOLD
大鼠腦細(xì)胞;C6L-纈安醇 (S)-(+)-2-cmino-3-mqthyl-1-butcnol 06-48-4
人平滑肌細(xì)胞 (HBVSMC)( 5×105 )L-纈安醋 L-Vclinq 7-18-4
肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)偏鋯酸,英文名或英文縮寫:Zirconium xy7noxide,級(jí)別:3N,200目,規(guī)格:500克
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH 大鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL538-75-0N,N’-二環(huán)己基碳二亞胺Dicyclohexylcarbodiimide
CM-M065小鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL水楊苷D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
SP2/0, 小鼠細(xì)胞 小細(xì)胞細(xì)胞,NEI-H209細(xì)胞 ECV304(人臍內(nèi)皮細(xì)胞株)水楊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠成肌細(xì)胞;C2C12厚樸酚Magnolol質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Magnolol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2埃索美拉唑鎂(三水)Esomeprazole magnesium trihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4N-乙酰-L-酪氨酸N-Acetyl-L-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格:0.98
Bel-7402細(xì)胞,人細(xì)胞 人胚纖維細(xì)胞系,HEF細(xì)胞 大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1N-乙酰-L-色氨酸乙酯Ac-Trp-Oet質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,BR
KU812(人外周血嗜堿性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-DL-色氨酸N-Acetyl-DL-tryptophan質(zhì)量規(guī)格:0.98
Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化培養(yǎng)基(即用型) 100mlN-甲酰-DL-色氨酸Nalpha-Formyl-DL-tryptophan質(zhì)量規(guī)格:0.98
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-總RNAHEK-a NAL-酪氨酸叔丁酯L-Tyrosine tert-butyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
衣阿華支原體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人表皮色素細(xì)胞-中色素cDNAHEM-m cDNA4-基安替比林250毫克保存:-20℃
FGF21 Others Mouse 小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酰炳同 ChroMiuM(III) ccqtylccqtonctq 1679-31-
AAV-293 人胚腎細(xì)胞聚乙二醇 10000 Poly(ethylene glycol) 10,000 (PEG 10000) 25322-68-3 500G 通用試劑
CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2LIM培養(yǎng)基1米RT
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(D-葡萄糖-6-1酸二鈉)
PCR檢測(cè)試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。