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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3941 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷 | Leptospira interrogansPCR | BKP3941 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-Fmoc-L-AsparagineN-芴甲氧羰基-L-天冬酸100克特，98%
人胚;CCC-HPF-13-錄-2-基炳1;γ-錄異;代1炳基錄;異基錄 3-Chloro-2-Mqthylpropqnq;β-Mqthcllyl chloridq;Isobutqnyl chloridq;3-Chloro-2-Mqthyl-1-propqnq 263-47-3
GES細(xì)胞，人腎上皮細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞,WEHI 231細(xì)胞 CL-0454TE-11(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2MMA甲基敗脂酸100克CP，98%
H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22′-脫氧胞苷25克
hCD34+-CB-c pooled 臍帶血來源的人類造血祖細(xì)胞，混合來源 100000 人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC145-50-6α-酚醌本基p-Naphtholbenzein
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)人參皂苷Rg5GinsenosideRg5質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，對照品
人肺動脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 Rattus兒茶素沒食子酯酸CG質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2氯化鎂銨,氯化銨鎂,六水合氯化鎂銨AMMoniuM MagnesiuM chloride質(zhì)量規(guī)格：CP
IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 訶子林鞣酸Chebulinic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL訶子鞣質(zhì),訶子鞣酸Chebulagic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷IL4 Protein Canine 重組狗 IL4 / Ierleukin-4 蛋白硫酸銨Ammonium sulfate質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級
人成纖維母細(xì)胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 ) MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 Mouse氯化銫Cesium chloride質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級
口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKM-prf6α-甲基21-醋酸鹽6α-Methylprednisolone 21-Acetate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
RET Others Human 人 RET Kinase (aa 658-1114) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-去甲伊馬替尼-d8N-Desmethyl Imatinib-d8質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人胚腎細(xì)胞-F克隆;293FN-去甲伊馬替尼N-Desmethyl Imatinib質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人癌細(xì)胞;SK-BR-34-基-2,3-二甲基偶氮本500毫升RT
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 錄酚紅 chlorophqnol rqd 4430-0-0
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsβ-甘油1酸鈉 β-Glycerophosphate di (BioUltra... 154804-51-0 10G 通用試劑
U373細(xì)胞，人腦細(xì)胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgGLYCYLGLYCINE雙甘二肽*白色精細(xì)粉末RTsigma
SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DTT 1g/2g/5g Amresco分裝
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
