產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4103 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
西方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Nosema apisPCR | BKP4103 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:西方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 微量可調(diào)移液器P1001克保存:-20℃
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL2--1-甲基代 2-Chloro-1-methylpyridinium iodide,97% 14338-32-0 500G 通用試劑
Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycinL-脯安醇 L-(+)-Prolinol 3326-96-9
IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標簽)司盤401公斤
人內(nèi)殼細胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 Mouse胞苷-2(3`)1酸NA
BHK-21(倉鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2異丁司特Ibudilast質(zhì)量規(guī)格:>98%
CTSA Others Human 人 Cathepsin-A / CTSA 人細胞裂解液 (陽性對照) 異丁司特(標準品)Ibudilast質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17吉西他濱Gemcitabine質(zhì)量規(guī)格:>98%,free base
ALDH4A1 Others Human 人 ALDH4A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 沙利度胺(反應(yīng)停)Thalidomide 質(zhì)量規(guī)格:>98%
CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2沙利度胺(標準品)Thalidomide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
西方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)小鼠神經(jīng)干細胞柴胡皂苷B2(標準品)Saikosaponin B2質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人胚胎,皮膚,肌肉;M-22 人食管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL柴胡皂苷C(標準品)Saikosaponin C質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人間充質(zhì)干細胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA柴胡皂苷D(標準品)Saikosaponian D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照) 常春藤皂苷元(標準品)Hederagenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠肝細胞;BRL 3A常春藤皂苷元Hederagenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
人破骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL品紅,英文名或英文縮寫:Fuchsin basic,級別:生物技術(shù)級,65%,柑橘來源,規(guī)格:250毫克
PA317細胞,小鼠胚成纖維包裝細胞 6T-CEM(T細胞) 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-11 Bornqol 207-70-0
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)TMB游離酸溶液,英文名或英文縮寫:3,3,5,5-Tetrametxyl benzidine solution liquid-1 component,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
A-427(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9ORANGEGwo7iumSALT橙黃G 鈉*100G1936-15-8RT
人肺動脈內(nèi)皮細胞總RNAHPAEC NA(N-乙酰-D-基葡萄糖)