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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4038
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4038
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書

Mycobacterium spp.PCR

BKP4038

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)L(+)-2--5-脲戊酸,英文名或英文縮寫:L-Citrulline,級別:BR99%,規(guī)格:25

HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)1,2-二基本;鄰二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3

HUM, 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞桑色速;摩林;;2,3,4,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 媒染藍(lán)B,英文名或英文縮寫:Acid alizarin blue B,級別:ACS級,規(guī)格:1

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE
DYRK3 Others Human
DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:

tTA基因修飾的小鼠(B);F9-CAG-tTA-4D6交叉縫式碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)

COLO 205細(xì)胞,細(xì)胞 正常人肝細(xì)胞,L-02細(xì)胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞)5×106cells/瓶×2復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)(允許溫度上限:620)Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C)質(zhì)量規(guī)格:

APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)

CLEC4M Others Human CD299 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)
分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:BR

JeKo-1 人套細(xì)胞瘤細(xì)胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

22RV1人細(xì)胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質(zhì)量規(guī)格:0.99

其他細(xì)胞因子2-脫氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

小鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 HumanD-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galactose質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene

QG-56細(xì)胞,肺扁平上皮癌細(xì)胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene

IFNGR1 Others Human IFN-gamma R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-](>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]

人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。


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