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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4022
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4022
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書

Mycobacterium aviumPCR

BKP4022

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞碳酸5

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM9401 人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL固紅RC Diazo Red RC 68025-25-2 25G 通用試劑

非必需氨基酸 100XNEAA言醋伊立替康 Irinotqccn xy7nochloridq 13627-09-3

MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氧化釔100毫克

人小細胞細胞;NCI-H44658812-37-6川楝素Toosendanin
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish)
斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸苯海拉明Diphenhydramine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]鹽酸苯海拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)Diphenhydramine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

MRC-5細胞,人胚肺細胞 大鼠肺上皮Ⅱ型細胞,RLE-6TN細胞 T-109B彈性蛋白酶(100mL酶解緩沖液)10mL聚肌苷酸Polyinosinic acid質(zhì)量規(guī)格:≥90.0%,BR

SK-OV-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2米屈肼Mildronate,Meldonium質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,二水合物

HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)Mildronate,Meldonium質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿替美唑鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Atipamezole HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠骨髓細胞;FDC-P1阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Cytarabine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

LM-6細胞,人細胞系 小鼠細胞,L1210細胞 兔主動脈平滑肌細胞;SMC達卡巴嗪Dacarbazine質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細胞培養(yǎng)

MA-782(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2達卡巴嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Dacarbazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2(即用型) 500ml達沙替尼(無水)Dasatinib質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,無水
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;MuM-2C 大鼠內(nèi)臟脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL馬尿酸鈉培養(yǎng)基100

M1 小鼠細胞俾氏麥棕Y Biological stain 10114-58-6 25G 通用試劑

PLA2G7 Others Human PLA2G7 / PAFAH 人細胞裂解液 (陽性對照) 1醋羌炳酯 xy7noxypropyl ccrylctq 2284-83-

人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2草酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium oxamate,級別:BR98%,規(guī)格:25

FUT8 Others Human FUT8 (aa 68-575) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) PectolaseY-23 100mg/500mg/1g/10g原裝 Yakult.JAPAN


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