產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4021 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型PCR檢測試劑盒直銷【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Mycobacterium avium subspecies paratuberculosisPCR
【貨號】: BKP4021
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十烷基基溴化500毫克2~8℃
LS174T 人細(xì)胞5-溴-2-錄嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2
MDA-MB-231人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS溶葡球菌酶100克
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3-錄本酸25克
人羊膜細(xì)胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系 Human(沙氏葡糖瓊脂)
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白石英砂Quartz sand質(zhì)量規(guī)格:BR
MuM-2B(人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 臍內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-氨基-1,2,4-三唑3-AT質(zhì)量規(guī)格:>96%,分子生物學(xué)級
小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk1酸鈉十二水 phosphate, tribasic, dodecahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
ACVR1 Others Rat 大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 無水1酸氫二鈉(分子生物學(xué)級) phosphate, dibasic, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
人小氣道平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL菲啰嗪,菲洛嗪Ferrozine質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
IFNA8 Protein Human 重組人 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-苯甘氨醇 2-Phenylglycinol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HHCC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 粘質(zhì)沙雷伯氏菌甘氨酸-L-亮氨酸 Glycyl-L-leucine質(zhì)量規(guī)格:0.98
腦動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Amberlyst 15離子交換樹脂(干)Amberlyst 15 ion-exchange resin質(zhì)量規(guī)格:干
BCCIP Others Human 人 BRCA2 / BCCIP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Amberlite® IRA-900 陰離子交換樹脂Amberlite® IRA-900質(zhì)量規(guī)格:
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815Amberlite® XAD16非離子型大孔樹脂(20-60 mesh)Amberlite® XAD16質(zhì)量規(guī)格:20-60 mesh
鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型PCR檢測試劑盒直銷視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)茄尼醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品Solanesol
GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside
tTA基因修飾的小鼠細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3秦皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Fraxin
SH-SY5Y細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 人細(xì)胞,GBC-SD細(xì)胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2秦皮甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Esculin
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0氨基三乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法雜質(zhì)檢查用Nitrilotriacetic acid
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。