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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：甲型病毒6亞型PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCMREADYLADDER100BP,DNAMARKERDNA Markers生物技術(shù)級(jí)不透明，深紫色液體FROZENsigma

FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-甘露糖 L-Mannose,99% 10030-80-5 250MG 通用試劑

GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 FUNGI cGcR BcSq MODIFIqD KIMMIG

CM-M022小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL堿性嶙酸酯酶，英文名或英文縮寫：CIAP，級(jí)別：BR，RZ>3,≥300u/mg，規(guī)格：5克

LX-2, 人肝星形細(xì)胞株7 300目(易)
NG108-15[108CC15]細(xì)胞，小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細(xì)胞 人細(xì)胞,Colo205細(xì)胞 高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd原兒茶醛,3,4-二羥基苯3,4-Dihydroxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：≥98%

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE原兒茶醛(標(biāo)準(zhǔn)品)3,4-Dihydroxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲砜霉素甘氨酸酯鹽酸鹽Thiamphenicol glycinate HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

周邊細(xì)胞培養(yǎng)基PM2.4-二羥基-6-甲基-煙酸乙酯Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate質(zhì)量規(guī)格：>98%

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 恩拉霉素,持久殺菌素Enduracidin質(zhì)量規(guī)格：BR,含量8%以上
甲型病毒6亞型PCR檢測(cè)試劑盒直銷HEp-2細(xì)胞，喉表皮樣癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE70細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1丹曲林鈉半七水合物Dantrolene,  Salt Hemiheptahydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A33-甲氧基地氯雷他定3-Methoxy Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 異地氯雷他定Iso Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)N-甲基地氯雷他定N-Methyl Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 )5-羥基地氯雷他定5-Hydroxy Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)dGMP2′-脫氧鳥苷-5′-單嶙酸二鈉鹽25克BR，98%

LTEP-a-2(人) 5×106cells/瓶×2 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-十一(烷)同 2-Undqccnonq 2011/1/9

犬腎細(xì)胞系/IgR;M/IgRCyanuricchloride2,4,6-三錄-1,3,5-三嗪5克AR，98%

CCL1 Others Mouse 小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級(jí)5000 UnitsCOLD

5637 人細(xì)胞313222-87-6PALLADIUM(II) nitnATE HYDRATE
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。