產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3917 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Klebsiella aerogenesPCR
【貨號】: BKP3917
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
人脈絡(luò)絲表皮細胞 (HCPEpiC)( 5×105 )LBBROTH,MILLER(LURIA-BERTANI)LB肉湯組織培養(yǎng)級米白色至棕褐色粉末RTsigma
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-異丁基-1-基皇嘌呤(-20℃) 3-ISOBUTYL-1-MqTHYLXcNTHINq 88-28-4
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLADENOSINEFREEBASE腺苷*白色晶體或結(jié)晶粉末COLDsigma
DCS 小鼠樹突狀細胞細胞RIBOZOL,RNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑100 mlRT
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) (兩性電解質(zhì)) 12ml
LncaP, 人細胞 Human托拉塞米(標準品)Torasemide質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘哌地爾Naftopidil dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠小腦星形膠質(zhì)細胞MA-c萘哌地爾(標準品)Naftopidil dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 厄貝沙坦(標準品)Irbesartan質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1馬來酸替加色羅(標準品)Tegaserod maleate質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒直銷QBC-939, 人細胞 Human柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基丁二(>98%,BR)N-Hydroxysuccinimide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人細胞;CNE-2Z沒食子酸一水物(標準品)Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解液 (陽性對照) 沒食子酸一水物Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)a-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)N-Phenyl-9-anthramine
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Iodonaphthalene
CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL苯并[a]蒽(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Benz[a]anthracene
HCT116細胞,人結(jié)細胞 人色素瘤細胞,HME1細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-171H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)1H-Cyclopenta[l]phenanthrene
GBC-SD(人細胞) 5×106cells/瓶×29-氨基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格:美國進口9-Aminocamptothecin
PCR檢測試劑盒:
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。