產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3912 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒病毒PCR檢測試劑盒價格 | Japanese Encephalitis Virus(JEV)()RTPCR | BKP3912 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CD14 Others Rat 大鼠 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) xlonofonm錄仿生物技術級透明無色液體RT不sigma
大鼠骨髓基質細胞完全培養(yǎng)基 100mL3-叔丁基本酚 99% 3-tqrt-Butylphqnol 282-34-
BV-2小鼠小膠質細胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS墨汁10只/袋RT
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)RNase&DNase清除劑,英文名或英文縮寫:Rnase&Dnase away,級別:BR,0.3-3.0u/mg,規(guī)格:500克
VE(人內皮細胞) 5×106cells/瓶×2 胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)93-58-3本metxyl benzoate;Oil of niobe;Benzoic acid metxyl ester
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞溴化乙錠(EB)Ethidium bromide(EB)質量規(guī)格:>95%
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0908 人破骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL貝西沙星鹽酸鹽Besifloxacin HCl質量規(guī)格:>99%,BR
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE甜菜堿(標準品)Betaine質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 甜菜堿Betaine質量規(guī)格:>99%,無水高
腎上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)尿酸Uric acid質量規(guī)格:0.99
病毒病毒PCR檢測試劑盒價格CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標簽)靈芝酸I(標準品)Ganoderic acid I質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) TG100-115TG100-115質量規(guī)格:>98%,PI3Kγ/δ抑制劑
人低分化;GLC-82 [GLC82]鹽酸地芬尼多(標準品)Difenidol Hydrochloride質量規(guī)格:供含量測定用
人毛發(fā)基質細胞(HHZMC)( 5×105 )鹽酸烏拉地爾Urapidil Hydrochloride質量規(guī)格:>99%,BR
CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2鹽酸烏拉地爾(標準品)Urapidil Hydrochloride質量規(guī)格:含量測定
CPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene
人牙齦成纖維細胞裂解物HGFL2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]
CD59 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene
人非小細胞;NCI-H19752,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene
MHCC97-L細胞,人低轉移細胞 小鼠細胞,P388細胞 兔腎細胞;RK-134,5-亞乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。