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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3878 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Infectious Myonecrosis Virus(IMNV)RTPCR
【貨號】: BKP3878
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
心肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級100G5704-4-1RT
MCF7細(xì)胞，人癌細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞,HCC38細(xì)胞 髓核細(xì)胞生長添加物NPCGS(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3標(biāo)樣 Lqcd 7439/9/1
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-Chloromercuribenzoicacid對錄高本酸500克AR，99%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1GDX 203(聚二本多孔小球)NA
PCSK9 Others Rat 大鼠 PCSK9 / NARC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羅格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）rosiglitazone hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
原代滑膜皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml苯溴馬?。?biāo)準(zhǔn)品）BENZBROMARONE質(zhì)量規(guī)格：含量測定
MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸布替萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Butenafine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21鹽酸托烷司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Neuro-2A細(xì)胞，腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 人細(xì)胞,HepG2.2.1.5細(xì)胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸托烷司瓊Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
病病毒PCR檢測試劑盒說明書人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)1酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人細(xì)胞;NCI-H1650氨1汀硫醇二鹽酸Amifostine Thiol Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利游離堿Benazepril Free base質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS拉莫三嗪-13C3Lamotrigine-13C3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CRT細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞 曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-h miRNA5 μgD-半乳糖醛酸甲酯D-Galacturonic acid methyl ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
RAW 264.7細(xì)胞，小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3熒光素100克
CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)5-氧基-2-本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1
PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen
人低分化;GLC-82 [GLC82]血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量：100克
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
PCR檢測試劑盒：
病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
