產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3871 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒供應 | Inclusion Body Hepatitis Virus(IBHV,FAVA)PCR | BKP3871 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 (His 標簽)β-,英文名或英文縮寫:2-pxenylethanol,級別:AR,99%,規(guī)格:1克
Sp2/0-Ag14(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 C6(腦細胞)鋇 BcriuM;
T-110B透明質酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL乙酸辛酯,英文名或英文縮寫:Octyl acetate,級別:AR,98%,規(guī)格:25克
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化銪shēng huà shì jì容量:RT25克
口腔角質細胞生長添加物OKGS(細胞分離液)
PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢硫脒;先鋒霉素18號Cefathiamidine質量規(guī)格:>97%,BR
腎動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-絲氨酸H-D-Ser-OH質量規(guī)格:>98%,BR
散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21 人成纖維細胞,Hs 578Bst細胞 HO-8910PM(高轉移細胞)D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽D-Serine methyl ester hydrochloride 質量規(guī)格:>98%,BR
人結細胞;T84D-蘇氨酸H-D-Thr-OH質量規(guī)格:>98%,BR
FOLH1 Others Mouse 小鼠 FOLH1 / GCPII / PSMA / NAALAD1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-色氨酸甲酯鹽酸鹽D-Tryptophan methyl ester hydrochloride質量規(guī)格:0.98
即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒供應AIM2 Others Human 人 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 山崳酸(標準品)Behenic acid質量規(guī)格:分析標準品
小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20乙基叔丁基(標準品)tert-Butyl ethyl ether質量規(guī)格:分析標準品
293T/17[HEK 293T/17]細胞,人胚腎細胞 人膽管細胞型細胞,HCCC-9810細胞 CL-0160Molt-4(人急性母細胞細胞)5×106cells/瓶×2alpha-熊果苷alpha-Arbutin 質量規(guī)格:>98%,BR
倉鼠卵巢細胞;Lec1西多福韋二水合物Cidofovir dihydrate 質量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
FGFR4 Others Mouse 小鼠 FGFR4 / CD334 人細胞裂解液 (陽性對照) NVP-AUY922AUY922質量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-HistidineHCLH2ODL-氫錄組酸5克BR,99%
人角膜內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL3-(4-錄本基)務二醋, 98% 3-(4-Chlorophqnyl)glutcric ccid 3271-74-0
B95-8細胞,產EBV的絨猴白細胞 A549(人) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1D-FructoseD-糖1KU4種混合,10mM/種
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)L-天門冬酸,英文名或英文縮寫:L-Aspartic acid Mg salt,級別:BR,98%,規(guī)格:100克
HEL(人紅白細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 肝實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)143-08-81-壬醇;第九醇;辛基1-Nonanol;Octyl carbinol;Pelargonic alcohol;Nonalol;Alcohol C-9
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。