產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3853 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人多瘤病毒9PCR檢測試劑盒直銷 | Human Polyomavirus 9 9 PCR | BKP3853 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人多瘤病毒9PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
色素細胞生長生長添加物MelGSPCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術級500 lFrozen
RSPO1 Others Human 人 RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照) (1R)-(+)- (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8
CSSTH1 中華鱉心肌來源細胞典化 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0
T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL1,2,4,5-本四甲羧酸二酐,英文名或英文縮寫:PMDA,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
RGC-5, 小鼠視網膜神經節(jié)細胞24589-78-4N-甲基-N-(基硅烷基)三扶乙酰胺N-metxyl-N-(trimetxylsilyl)trifluonoeetemi7e
Ski細胞,人宮頸上皮細胞癌 人急性細胞T細胞,CCRF-CEM細胞 大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6乙酸二丙基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞) 5×106cells/瓶×2乙酸二戊基銨(約0.5mol/L水溶液)[離子對色譜級]IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑
CPB1 Others Human 人 CPB1 / PCPB 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑
中國倉鼠肺細胞;V791-辛烷磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-8質量規(guī)格:離子對色譜用試劑
CALU Others Human 人 CALU / Calumenin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-壬烷磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-9質量規(guī)格:離子對色譜用試劑
人多瘤病毒9PCR檢測試劑盒直銷CL-0206SGC7901(人細胞)5×106cells/瓶×2草酸銨(98~101%,BR)Ammonium oxalate hydrate質量規(guī)格:98~101%,BR
MLF, 小鼠成纖維細胞5'-單1酸腺苷(>95%,BR)Adenosine-5'-monophosphate, free acid質量規(guī)格:>95%,BR
Sars結構蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸鋁十六水(>98%,BR)Aluminum sulfate, hexadecahydrate質量規(guī)格:>98%,BR
人急性早幼粒細胞;HL-60葡萄糖-6-1酸脫氫酶,硫酸銨懸浮液Glucose-6-phosphate dehydrogenase質量規(guī)格:酶活>200 NADP units/mg,BC
PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml,BC)Malate dehydrogenase質量規(guī)格:>12,000U/ml,BC
SUP-B15人Ph+急淋細胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate
成纖維細胞生長因子雙酚 C(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane
293FT(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid
人成纖維細胞cDNAHCF cDNA四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)Tetrabromobisphenol A
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-乙酰氨基-2-脫氧-D-半乳糖醛酸質量規(guī)格:美國進口2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。