產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3852 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Human Polyomavirus 7 7 PCR | BKP3852 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
CN5 Others Human 人 CN5 / Coactin-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-ASPARTICACIDL-天門冬酸*白色粉末RTsigma
大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-31-錄代二十碳烷 1-CHLOROqICOScNq 417-0-7
IL5RA Others Mouse 小鼠 IL5Ra / CD125 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) BROMOpxenOLBLUEwo7iumSALT溴酚藍(lán),鈉鹽ACS級(jí)淺紅色至紫色粉末RTsigma
前脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)199培養(yǎng)基1盒
興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL 人細(xì)胞,SW480[SW-480]細(xì)胞 Tca-8113(舌鱗癌細(xì)胞)Urea 250g/500g/1kg/5kg原裝 Amresco 0378
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞硝酸鈀Palladium (II) nitrate dihydrate質(zhì)量規(guī)格:BR
人惡性色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鈀粉(>99%,BR)Palladium, powder質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
M1 小鼠細(xì)胞乙酸副品紅(>85%,BS)Pararosaniline acetate質(zhì)量規(guī)格:>85%,BS
KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉Paxilline*, from Penicillium paxilli質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
小鼠前細(xì)胞;MFC青霉酸(>98% (HPLC),BC)Penicillic acid質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC
人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價(jià)格MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.97
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細(xì)胞 CGM1(EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞)L-絲氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Serine質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KBL-精氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Arginine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-精氨酸L-Arginine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10L-精氨酸鹽酸鹽L-Arginine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
MADB106(大鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one
Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one
人牙齦成纖維細(xì)胞HGF3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)3,3'-Bithiophene
CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)2,1,3-Benzothiadiazole
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS34,5-去亞異丙基托吡酯質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口4,5-Desisopropylidene Topiramate