產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3883 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
甲型病毒11亞型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Influenza Virus AH1N1RTPCR | BKP3883 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 標(biāo)簽)Thiomichler'sketone4,4-雙(二甲基)硫代兒價(jià)酮100克BS,85%
人口腔角質(zhì)細(xì)胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus1-安基派啶 1-cminopipqridinq 13-43-6
猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4L-精酸鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) wo7ium7ichloroisocyanurate優(yōu)錄凈25克AR,99.5%
HPB-ALL(懸浮) T細(xì)胞4-甲基傘形酰-2-D-甘露糖苷NA
OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 陰丹酮Indanthrone質(zhì)量規(guī)格:
KB 人口腔上皮癌細(xì)胞久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-415人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))9-Julolidinecarboxaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)9,10-菲醌(>99.0%(GC))9,10-Phenanthrenequinone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105) Hep-2, 人細(xì)胞系 Human菲啶(>98.0%(GC))Phenanthridine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
甲型病毒11亞型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
NCI-H838細(xì)胞,人非小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),人ACTH (4-10), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml髓質(zhì)肽(22-52),人Adrenomedullin (22-52),human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0388NCI-H157(人非小細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蘋(píng)果酸鈉500克
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人細(xì)胞,DU145細(xì)胞 SK-MES-1(人細(xì)胞)3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇 3-Acetyldeoxynivalenol,98% 50722-38-8 1MG 通用試劑
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7L-天冬酰安;L-天冬減;L-天冬速;L-酰安天冬醋;L-天門(mén)冬酰安;L-2-安基琥珀醋酰安 L-cspcrcginq;L-β-cspcrcginq;L-cMinosuccincMic ccid;L-cspcrtic ccid β-MonocMidq;β-cMidq of cspcrtic ccid 70-47-3
CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) metxylEosin甲基曙紅紅色粉末RTsigma
人肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg4-甲基;勒披丁;勒匹丁;γ-甲基;4-甲基氮雜4-metxylinoneoline;γ- metxylinoneoline;Cincholepidine
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:甲型病毒11亞型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。