產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3834 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產品名稱】: 人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR
【貨號】: BKP3834
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞錄化亞銻,英文名或英文縮寫:Antimony(III)chloride,級別:CP,規(guī)格:10克
ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化鎢銨 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用試劑
大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2
DH82狗腎惡性癥細胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS曙紅Y(水溶)shēng huà shì jì容量:100克
IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
TE671 subline No.2細胞,人橫紋肌細胞 化膿性鏈球菌 轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1妥布霉素ATobramycin A質量規(guī)格:美國進口
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標簽)生物素基妥布霉素酰胺Biotinyl Tobramycin Amide質量規(guī)格:美國進口
LS-174T(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照) 妥布霉素硫酸鹽Tobramycin sulphate質量規(guī)格:美國進口
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1氘化妥布霉素Tobramycin Deuterated質量規(guī)格:美國進口
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸拓撲替康標記 d6Topotecan Hydrochloride Labeled d6質量規(guī)格:美國進口
P3X63Ag8.653細胞,細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內皮細胞完全培養(yǎng)基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質量規(guī)格:美國進口
正常大鼠腎細胞;NRK伊立替康標記物d10Irinotecan Labeled d10質量規(guī)格:美國進口
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-O-甲基-d3-鳥嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質量規(guī)格:美國進口
口腔角質細胞培養(yǎng)基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質量規(guī)格:美國進口
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride質量規(guī)格:美國進口
人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰輔酶A 內鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-
MDA-MB-436 人腺癌細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑
NCI-H358人非小細胞細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細結晶RTsigma
KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標簽)(甘油)
PCR檢測試劑盒
人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。