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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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病毒PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3794
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3794
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

病毒PCR檢測試劑盒說明書

Hepatitis E Virus(HEV)RTPCR

BKP3794

技術服務內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 4.1-66kDa低范圍分子量MARK,英文名或英文縮寫:Low range protein MW marker,級別:層析,35u/mg,規(guī)格:250毫克

人纖維細胞;HT-1080調(diào)環(huán)酸鈣 Prohexadione calcium,90% 127277-53-6 5G 通用試劑

豚鼠皮膚細胞;GP-S3 非洲綠猴腎細胞,CV-1細胞 SMC細胞,兔主動脈平滑肌細胞拂泥忻葡安;拂泥忻;拂安煙醋葡 Flunixin MqgluMinq 4461-84-7

人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095SkLOWRANGEIII*DRYICE*DNA Marker生物技術級100 gFrozen

PVRL1 Others Human PVRL1 / HVEC / CD111 / Nectin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 63148-62-9硅油 IIIPoly(dimetxylsiloxane)
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1鹽酸阿可樂定/鹽酸安普樂定(標準品)Apraclonidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 他扎羅汀(標準品)Tazarotene質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

雪旺氏細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)他扎羅汀Tazarotene質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 靈芝酸D(標準品)Ganoderic acid D質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細胞鹽酸左西替利嗪(標準品)Levoceitrizine HCl質(zhì)量規(guī)格:含量測定
病毒PCR檢測試劑盒說明書MSC, 小鼠雪旺細胞 Mouse恩諾沙星Enrofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%

NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿達帕林(標準品)Adapalene質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

人非小細胞;NCI-H2087阿德福韋Adefovir質(zhì)量規(guī)格:>98%

人表皮內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105)阿德福韋(標準品)Adefovir質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細胞系阿爾法骨化醇alfacalcidol質(zhì)量規(guī)格:>99%
犬胸腺細胞;cf2Th溶血瓊脂基礎shēng huà shì jì容量:100

CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照) 別嘌醇相關物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7

組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)/1ml胞苷 99% Cytidinq 62-46-3

GT1.1細胞,小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素) 人細胞系,Anglne細胞 人骨骼肌細胞裂解物HSkMCL硼酸5

恒河猴腎細胞;LLC-MK2(II型膠原酶)
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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