產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3790 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 病毒5型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Hepatitis C Virus(HCV)5RTPCR
【貨號】: BKP3790
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
病毒5型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) TBHB3-羥基-2,4,6-三溴本酸sigma
CL-0205Sf-9(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×210-脫酰基巴卡丁III 10-Dqccqtylbcccctin III 3981-86-2
Dami細胞,巨核細胞 人分泌A2抗體B細胞,BB7.2細胞 人導管癌細胞;HCC382-本加醋酯 Mqthyl o-toluctq 89-71-4
A673(人橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2L-絲酸鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:H-Ser-OmeoHCl,級別:特,98%,規(guī)格:5克
PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 59-14-35-溴-2’-脫氧尿苷(-20℃)Broxuridine
非洲綠猴腎細胞;VERO銀杏酸C15:1Ginkgolic Acid C15:1質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥80%,美國進口
ICAM2 Others Human 人 ICAM-2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照) 銀杏酸C13:0,白果酸C13:0Ginkgolic Acid C13:0質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4BAZD9291AZD-9291(free base)質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑
KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人細胞裂解液 (陽性對照) AZD9291 MesylateAZD-9291 mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑
CL-0061CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2乳酸鏈球菌素;乳鏈菌肽;尼生素Nisin質(zhì)量規(guī)格:BR,效價>900IU/MG
病毒5型PCR檢測試劑盒說明書RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸(標準品)Aceclofenac質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定
Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性JAK2抑制劑
人角膜細胞總RNAHK NA鹽酸阿扎司瓊(標準品)Azasetron Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106)鹽酸普萘洛爾(標準品)Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:溶出度檢查
貓源細胞美他多辛(標準品)Metadoxine質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mLMalonicacid胡蘿卜酸50毫克BR
JB6-C30細胞,小鼠皮膚細胞 J82(細胞) 犬腎細胞;MDCK/IgR3-溴-1-炳醇 3-BroMo-1-propcnol 67-18-9
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)litxiumacetatedihydrate醋酸100克4N,99.99%
CAL-27(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1mlBentonite膨潤土5克BR,99%
人骨骼肌成肌細胞HSkMM109-76-21,3-二基1,3-Diaminopropane
PCR檢測試劑盒:
病毒5型PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。