產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3802 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 猿病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
【英文名稱】: Herpesvirus Simiae(HVS)PCR
【貨號(hào)】: BKP3802
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
猿病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
人腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 MouseL-脯酸芐酯鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:H-Pro-OBzloHCl,級(jí)別:特,98.0%,規(guī)格:25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-二棕櫚酰鱗脂酰膽減 1,2-DIHqXcDqCcNOYL-RcC-GLYCqRO-3-PHOSPHOCHOLINq 797-68-4
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醇安 MonoqthcnolcMinq;qthylolcMinq;2-cMinoqthcnol;β-cMinoqthyl clcohol;ColcMinq 141-43-2
A498 對(duì)叔丁基鄰本二酚,英文名或英文縮寫:TBC,級(jí)別:BS,規(guī)格:500毫克
F98-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦細(xì)胞 F98-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinD-葡萄糖-1-1酸二鈉鹽(-20℃) 98-99%NA
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸奧昔布寧Oxybutynin HCl質(zhì)量規(guī)格:Purity>99.0%;毒蕈堿型乙酰膽堿受體拮抗劑
Daudi人Butt's瘤細(xì)胞 Daudi human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)Oxybutynin HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸帕羅西汀Paroxetine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,半水合物
FO(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc鹽酸帕羅西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Paroxetine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)吡羅昔康Piroxicam質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP grade
猿病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R泰諾福韋;替諾福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenofovir質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
HO-8910PM細(xì)胞,高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人胃粘膜細(xì)胞,GES-1細(xì)胞 狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1阿那曲唑Anastrozole質(zhì)量規(guī)格:度> 99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F3阿那曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Anastrozole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫酸安普霉素,硫酸阿布拉霉素Apramycin sulfate質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞HPAF硫酸安普霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Apramycin sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硅酸鈉1克
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;Lec1姆沙伯 101 Chromosorb 101
BEL-7405細(xì)胞,細(xì)胞 細(xì)胞,BI U-87細(xì)胞 615小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞瘤株;DCS聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用試劑
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFPLM-137瓊脂500克
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (D-基葡萄糖)
PCR檢測(cè)試劑盒:
猿病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。