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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3795 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
庚型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Hepatitis G Virus(HGV)PCR | BKP3795 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：庚型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) TERRIFICBROTH,POWDER*肉湯, 粉末生物技術(shù)級(jí)100GRT
HL-60, 人早幼粒細(xì)胞鉬醋銨;四水合鉬醋銨;七鉬醋銨;仲鉬醋銨 cMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq;Molybdic ccid cMMoniuM sclt tqtrchydrctq;cMMoniuM hqptcMolybctq;HqxccMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq 1024-82-
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) H-Glu-PNAL-谷?；?/span>-4-硝基本胺100毫克BR，98%
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM9405胞嘧啶25克
GP2-293Luc細(xì)胞，人胚腎上皮包裝細(xì)胞 綠猴恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞 CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×2(豬膽鹽)
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雙甘氨二肽Gly-Gly質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細(xì)胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅活血清重組人胰島素Human recombinant Insulin質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)人胰島素Human Insulin質(zhì)量規(guī)格：測(cè)定用
HAN(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基SCM硝酸舍他康唑Sertaconazole nitrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)醋酸依降鈣素 Elcatonin Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR
庚型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)ME-180 人子宮頸表皮癌細(xì)胞4-(己氧基)苯(>98.0%(GC))4-(Hexyloxy)benzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
NCI-H292人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移) NCI-H292 human lung cancer cells (lymph node metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-庚氧基苯(>98.0%(GC)(T))4-Heptyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
KITLG Protein Mouse 重組小鼠 SCF / C-kit ligand 蛋白 (His 標(biāo)簽)4-差向-地美環(huán)素4-epi-Demeclocycline質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人葡萄膜色素細(xì)胞;UM 人氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢喹諾Cefquinome質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
急性T細(xì)胞細(xì)胞;TALL-104頭孢噻呋Ceftiofur質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亞苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)2,3,6,7,10,11-Hexamethoxytriphenylene
人細(xì)胞;Hela2,3,6,7,10,11-六羥基三亞苯水合物(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexahydroxytriphenylene Hydrate
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亞苯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene
CL-0421RAG(小鼠腎腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亞苯(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene
人羊膜上皮細(xì)胞 雙位點(diǎn)HC-KIT受體細(xì)胞株，DMF7細(xì)胞 BLO-11(小鼠骨骼成纖維細(xì)胞)1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
