產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3777 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒直銷 | Helicobacter pullorumPCR | BKP3777 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
大鼠纖維細胞(RLF)(5×105) BPH-1, 人細胞 Human羥脯酸測試前處理試劑shēng huà shì jì容量:RT25支/包
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1聚季銨鹽-10 Polyquaternium-10 68610-92-4 5G 通用試劑
人上皮細胞(HREpiC)( 5×105 )醋異務酯;醋醋務酯;醋醋異務酯;香蕉水;香蕉油;異務酯 IsocMyl ccqtctq;γ-Mqthylbutyl qthcnoctq;Bcncnc oil;cMyl ccqtctq;Pqcr oil;3-Mqthyl-1-butcnol ccqtctq 13-9-
CL-0187PK-15(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2十八酸乙酯,英文名或英文縮寫:etxyl stearate,級別:LR,95%,規(guī)格:5克
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15] 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL(兩性霉素B)
人腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL石蠟油Paraffin oil, light fraction質(zhì)量規(guī)格:分子生物學級,PCR Grade
APP-PS1細胞,人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293) 宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei) 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1乙酸鉀Potassium acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白無水乙酸鈉 acetate, anhydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
OS-RC-2(人細胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細胞裂解液 (陽性對照) 低熔點瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖Agarose, low gelling temperature質(zhì)量規(guī)格:BR;具有低凝膠溫度
小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3無水1酸二氫鉀Potassium phosphate, monobasic, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒直銷腦微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)檸檬酸三鉀一水Potassium tribasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Raji細胞,人Butt`s瘤細胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCLL-焦谷氨酸;氧脯氨酸H-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-L-焦谷氨酸Z-Pyr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CCD-1095Sk(人浸潤性導管癌旁皮膚細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網(wǎng)織細胞性瘤株;L615DL-m-酪氨酸DL-m-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格:0.98
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)肌氨酸甲酯鹽酸鹽H-Sar-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格:BR,98%
大鼠細胞;GH3N,N-二去乙基舒尼替尼鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口N,N-Didesethyl Sunitinib Hydrochloride
F11 Others Human 人 F11 / FXI 人細胞裂解液 (陽性對照) 舒尼替尼-d10質(zhì)量規(guī)格:美國進口Sunitinib-d10
上皮細胞生長添加物-2EpiCGS-2他克莫司-13C,D2(主要的)質(zhì)量規(guī)格:美國進口FK-506-13C, D2 (Major)
CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 24,32-雙-O-(tert-butyldimethylsilyl)-他克莫司質(zhì)量規(guī)格:美國進口24,32-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-FK-506
人細胞;DU 145 [DU145;DU-145]N-去乙基米那普侖質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desethyl Milnacipran
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。