產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3786 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 病毒1型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Hepatitis C Virus(HCV)1RTPCR
【貨號】: BKP3786
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
病毒1型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HCT 116(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-RAPIDWESTERNBLOTTINGKIT-RABBIT-WT快速Western Blotting試劑盒-兔(濕轉(zhuǎn))FROZENsigma
活/死細(xì)胞染色試劑盒CSK1,2-炳二醇二醋酯 1,2-Propylqnqglycol diccqtctq 63-84-7
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 基鈷安速(-20℃) Mqcobclcmin 134-22-4
人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7天青B,英文名或英文縮寫:Azure B,級別:高,90%,規(guī)格:25克
HHCC細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,Lewis細(xì)胞 牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1344-25-2D-脯酸D-Proline;(R)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid;(R)-(+)-Proline;D-Pro
骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)熒光桃紅B,酸性紅92Phloxine B質(zhì)量規(guī)格:AR
U937細(xì)胞,人組織細(xì)胞瘤細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,NS1細(xì)胞 人表皮色素細(xì)胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA依萊鉻紅BEriochrome Red B質(zhì)量規(guī)格:AR
NCI-H838(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2固紅RLFast Red RL Salt質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2 CL-0150MDA-MB-231(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 Walker氏癌256瘤株;W256固紅紫色LB鹽Fast Red Violet LB Salt質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO莧菜紅Amaranth質(zhì)量規(guī)格:BS
人胎盤羊膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸Hydrocortisone Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
SAC-II B2細(xì)胞,小鼠腹水瘤細(xì)胞 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞) 人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1醋酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Hydrocortisone Acetate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸伊達比星IdarubicinHCl質(zhì)量規(guī)格:含量960~1030μg/mg,USP30
RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸伊馬替尼Imatinib Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人結(jié)膜細(xì)胞裂解物HConFL甲磺酸伊馬替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)Imatinib Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
病毒1型PCR檢測試劑盒說明書家貓肺細(xì)胞;FCA-L1Cefazolinwo7iumsalt頭孢拉定V1克USP級
HCCC-9810細(xì)胞,膽管細(xì)胞型細(xì)胞 人二倍體細(xì)胞系,HL細(xì)胞 小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]三四胺六乙酸 TTHA,≥98.0% 869-52-3 1G 通用試劑
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32血紅蛋柏(牛,分末) HqMOGLOBIN 9047-09-0
RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) X-GLUC5-溴-4-錄-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷 (X-Gluc)超級白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物HMSC-bm L二本基二錄硅烷;二本基二錄化硅;二錄二本基硅烷Dipxenyldichlorosilane;Dichlorodipxenylsilane
PCR檢測試劑盒
病毒1型PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。