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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3759 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
副雞嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Haemophilus paragallinarumPCR | BKP3759 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：副雞嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
PRSS8 Others Mouse 小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 血清兔抗FITC1公斤RT
CL-0009769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×23--1,2,4-三氮坐 1H-1,2,4-Triczolq-3-thiol
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 皮膚色素瘤細(xì)胞,SK-HEL-1細(xì)胞 HCCLM3(細(xì)胞)PIPESwo7iumSALTPIPES, Na*白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
小鼠細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素);AtT-20L-HISTIDINEMONOxy7noCHLORIDEMONOHYDRATEL-組酸鹽酸鹽美國(guó)食品化學(xué)品法典級(jí)白色粉末RTsigma
FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異亞丙基MESITYL OXIDE
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]三乙?；?/span>-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC))Triacetyl-β-cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)
FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))10,12-Heptacosadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A52,4-十七二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heptadecadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)
BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heneicosadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)
人胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))10,12-Heptadecadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)
副雞嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFPN-十八烷酰-D-鞘氨醇N-Stearoyl-D-Sphingosine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-去異丁基-N-丙基利福布汀N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人表皮色素細(xì)胞-中色素裂解物HELM-m L25-去乙酰基利福噴汀25-Desacetyl Rifapentin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 利魯唑-13C,15N2Riluzole-13C,15N2質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-羥基利魯唑N-Hydroxy Riluzole質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
SL-7細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A聚乙酸酯shēng huà shì jì容量：RT50克
魚(yú)源細(xì)胞2,4,5-三拂本安 2,4,5-Trifluorocnilinq 367-34-0
DPP4 Others Human 人 DPPIV / DPP4 / CD26 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升
人卵巢表層上皮細(xì)胞HOSEpiC緩沖MUG瓊脂shēng huà shì jì容量：25毫升
PVRL1 Others Rat 大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 112-12-92-十一(烷)酮2-Undecanone
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
