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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3758 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書 | Haemophilus influenzaePCR | BKP3758 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-葡萄糖醛酸-r-內(nèi)酯，英文名或英文縮寫：D-Glucurone，級別：BR，98%，規(guī)格：1克
人海馬神經(jīng)元 人細(xì)胞，NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(瘤細(xì)胞)(S)-(+)-同洛芬 (S)-(+)-Kqtoprofqn 161-81-2
人色素瘤細(xì)胞;A875L-溶血卵鱗脂(冷藏運輸) Lysophosphctidylcholinq 9008-30-4
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CAPSOFREEACIDCAPSO超級25G73463-39-5RT
大鼠腦細(xì)胞;C64975-73-9N,N’-二環(huán)己基-4-嗎啉脒N,N'-Dicyclohexyl-4-morpholinecarboxamidine
人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞 Rattus芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）Fmoc chloride質(zhì)量規(guī)格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5氟羅里硅土(農(nóng)殘級)Florisil®質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級
人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)質(zhì)量規(guī)格：250-125um
Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)吡氟禾草靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution質(zhì)量規(guī)格：0.101mg/ml
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL惡唑酮菌(標(biāo)準(zhǔn)品) Famoxadone solution質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧鳥苷-3'-單1酸二鈉2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生HEK-nN-乙酰-DL-甲硫氨酸N-Acetyl-DL-mine質(zhì)量規(guī)格：0.99
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格：0.95
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸m-Fluoro-DL-tyrosine 質(zhì)量規(guī)格：0.99
BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)Calpain Inhibitor I(ALLN) 質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進(jìn)口
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口3'-p-Hydroxy Paclitaxel
SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細(xì)胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Paclitaxel-d5
BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口7-epi-Taxol
人小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Paclitaxel C
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
