產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3748 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒價格 | Guaratuba VirusRTPCR | BKP3748 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
CL-024916HBE(人上皮樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2測試盒(化學(xué)法測NO2)shēng huà shì jì容量:RT25塊/盒
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞 豬腎細(xì)胞,LL-PK1細(xì)胞 Hs 578Bst(細(xì)胞)6--1-并三... 6-Chloro-1-hydroxibenzotriazol,99% 26198-19-6 500G 通用試劑
人低分化;SK-LU-1(s)-(-)-α-基芐安 L-1-Phqnylqthylcminq 67-86-3
B4GALT1 Others Human 人 B4GALT1 / GGTB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 抗生素Ⅱ號培養(yǎng)基(Ph7.8~8.0)shēng huà shì jì容量:100克
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]18423-43-3胞苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)Deoxythymidine triphosphate
人氣管平滑肌細(xì)胞 (HTSMC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse異蒽酮紫Isoviolanthrone質(zhì)量規(guī)格:
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr2-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC))2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))Naphtho[2,3-a]pyrene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
CL-0069COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))2-Chlorophenothiazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
HL-60細(xì)胞,早幼粒急性細(xì)胞系 人T細(xì)胞瘤,Hurt-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C22-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒價格CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 常山酮 Halofuginone質(zhì)量規(guī)格:提取含量5%以上
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟RNAHMSC-hp miRNA5 μg戈米辛D(標(biāo)準(zhǔn)品)Gomisin D質(zhì)量規(guī)格:>98.0% (LC&T),標(biāo)準(zhǔn)品
LOXL2 Others Human 人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基1-Methyl Xanthine質(zhì)量規(guī)格:>98%
OVCaR-3 人細(xì)胞6-羧基-X-羅丹明6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX 質(zhì)量規(guī)格:>95%
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元西侖吉肽Cilengitide,EMD121974,NSC 707544質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術(shù)級25G
MDA-MB-157細(xì)胞,癌細(xì)胞 人胎盤絨膜癌細(xì)胞,BeWo細(xì)胞 人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg硼完二流迷絡(luò)合物 Borcnq-Mqthyl sulfidq coMplqx ccroSqcl 139-87-0
恒河猴腎細(xì)胞;MMK2Bismuth鉍20毫升FGC,60-80目
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) MALTEXTRACT麥牙提取物細(xì)菌學(xué)級500GCOLD
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA(N-羥基琥珀生物素)
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。