產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3739 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鵝細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Goose Parvoiruvs(GPV)PCR | BKP3739 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鵝細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
LILRB2 Others Human 人 LILRB2 / ILT4 / LIR-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-半胱酸鹽酸一水化合物shēng huà shì jì容量:1公斤
人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]硫代水楊酸 Thisosalicyilic acid,97% 147-93-3 25G 通用試劑
293T/17細(xì)胞,SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) 鼠小腦細(xì)胞,C8-D1A細(xì)胞 CL-0259BC-020(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2十七醇;1-羌基十七烷 Hqptcdqccnol;1-Hqptcdqccnol;clcohol C17;1-xy7noxyhqptcdqccnq 1424-82-9
ZR-75-30(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2n-Octanol正辛醇100克BR,40%
HBSMC-c 人類平滑肌細(xì)胞(HBSMC) 500,000cells *真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)二本并99%NA
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A鹽酸普羅帕酮Propafenone Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 呫噸酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Xanthene-9-carboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml呫噸酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Xanthone質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查用
CD40LG Others Human 人 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲基丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl eugenol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
Marc145 猴胚胎腎上皮細(xì)胞香葉醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Geraniol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
鵝細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)K-562(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2白當(dāng)歸腦(標(biāo)準(zhǔn)品)Byakangelicol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-25120 Hepatocyte Maienance MediumKIT, 肝細(xì)胞維持培養(yǎng)液套裝 500ml白當(dāng)歸素(標(biāo)準(zhǔn)品)Byakangelicin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]白果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)(?)-Bilobalide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Peucedanol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7環(huán)杷明;環(huán)巴胺;去氧芥芬胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyclopamine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品;Hh信號(hào)通路拮抗劑,作用于Smo
人細(xì)胞;MGC-803 大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雙(羰基二硫代)四硫富瓦1(>95.0%(W))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W)Bis(carbonyldithio)tetrathiafulvalene
Hepa 1-6 小鼠細(xì)胞1,2-苯二硫醇(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)1,2-Benzenedithiol
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,5-雙(甲硫代)-1,3-二硫醇-2-酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4,5-Bis(methylthio)-1,3-dithiol-2-one
人羊膜細(xì)胞;WISH二馬來腈二鈉(>90.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(N)Di Dimercaptomaleonitrile
TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5(6)-氨基熒光素質(zhì)量規(guī)格:0.95(6)-Aminofluorescein