產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3722 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Gallibacterium anatisPCR
【貨號】: BKP3722
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
A673細胞,橫紋肌瘤細胞 人非小細胞細胞,NCI-H838細胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2日落黃FCF,英文名或英文縮寫:Sunset Yellow FCF,級別:FMP,75%,規(guī)格:100克
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K12-氧代-1-基炳晴 2-OXO-1-PYRROLIDINqPROPIOnitnILq 7663-76-2
FGFR2 Others Human 人 FGFR2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芐氧羰基-L-谷酰,英文名或英文縮寫:Z-Gln-OH,級別:BR,98%,規(guī)格:100克
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元3-[(3-膽基)二甲基基]-2-羥基-1-磺酸內(nèi)鹽,英文名或英文縮寫:CHAPSO,級別:ACS,規(guī)格:25克
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 82-22-41,1-二醌亞胺1,1'-DIANTHRIMIDE
胎牛血清FBS酸洗石棉Asbestos acid washed質(zhì)量規(guī)格:AR
PLXDC1 Others Human 人 PLXDC1 / TEM3 / TEM7 人細胞裂解液 (陽性對照) 苊(標準品)Acenaphthene質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
CHO 中國倉鼠卵巢細胞鋁標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3)Aluminum solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3
CL-0038BRL(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2鋁標準溶液(100μg/mL,基體:5%HCl)Aluminum solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:5%HCl
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系(+/-)-兒茶精(標準品)(±)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
角膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2-代-5'-乙基酰胺基腺苷2-Iodo-5'-ethylcarboxamido Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
PRELP Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照) 瑞加德Regadenoson 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人細胞;EC1095-氮胞苷/阿扎胞苷(標準品)Azacitidine (5-Azacytidine)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T 瘤細胞,EL4細胞 RMC細胞,大鼠腦膜細胞鹽酸氮卓斯汀Azelastine HCl質(zhì)量規(guī)格:度>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人胚;HFL1鹽酸氮卓斯汀(標準品)Azelastine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書大鼠細胞;UMR-106D-AlanineD-2-基5克BR,99%
CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-硼醋 2-Thiophqnqboronic ccid 6162-68-0
人扁桃體上皮細胞HTEpiCCobalt(II,III)oxide氧化鈷100克CP
HA Others H5N9 甲型 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) wo7iumxy7noXIDEBEADS,珠子試劑級小直徑白色珠子RT不sigma
雪羊皮膚細胞;SSHS1(Earle’s平衡鹽)
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。