產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3733 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
藍(lán)氏賈第鞭毛蟲型PCR檢測試劑盒直銷 | Giardia lambliaAPCR | BKP3733 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]鏈脲佐菌素shēng huà shì jì容量:100克
非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37CBZ-L-纈酸 N-Carbobenzyloxy-L-valine,99% 1149-26-4 5G 通用試劑
CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 典烷;基典 Iodoqthcnq 1972-3-6
人肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLHRP標(biāo)記羊抗狗IgGshēng huà shì jì容量:RT250克
M14細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 枯草芽孢桿菌色變種 人細(xì)胞;A-427 [A427]635-65-4膽紅素(+4℃)Bilirubin
腎動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸丁卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetracaine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
BA/F3細(xì)胞,小鼠原B細(xì)胞 人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 NeuroFectagen? 神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒苯甲唑啉鹽酸鹽/鹽酸妥拉唑林Tolazoline HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)口原裝
非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E61酸托特羅定Tolterodine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,M受體(毒蕈堿型乙酰膽堿受體)拮抗劑
IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸托特羅定(標(biāo)準(zhǔn)品)Tolterodine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
幼蚊細(xì)胞;C6/36托吡酯Topiramate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
藍(lán)氏賈第鞭毛蟲型PCR檢測試劑盒直銷犬源細(xì)胞地紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Dirithromycin質(zhì)量規(guī)格:>95%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定
小鼠細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿魏酸乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethyl ferulate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 其它CAPS; 3-(環(huán)已胺)丙磺酸CAPS質(zhì)量規(guī)格:>99%
ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 巴豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Crotonoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞裂解物HPMSCL巴西蘇木素(標(biāo)準(zhǔn)品)Brazilin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
少突膠質(zhì)前體分化生長添加物OPCDSFmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine
ST6GAL1 Others Human 人 ST6GAL1 / SIAT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-赤-鞘氨醇(硫酸)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口D-erythro-Sphingosine (sulfate)
CSSTL1 中華鱉肺來源細(xì)胞D-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口D-erythro-Sphingosine-1-phosphate
T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mLN-十八烷酰-D-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N-Stearoyl-D-Sphingosine
GC-1, 鼠精原細(xì)胞N-去異丁基-N-丙基利福布汀質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:藍(lán)氏賈第鞭毛蟲型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。