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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3727 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
加德納菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Gardnerella vaginalisPCR | BKP3727 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
HCCC-9810細(xì)胞，人膽管細(xì)胞型細(xì)胞 小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性,NFS-60細(xì)胞 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級COLDsigma
MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經(jīng)節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7
kasumi-1, 人細(xì)胞株Atr莠去津5克超，100mM
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內(nèi)酯D-Glucurone
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)舒緩激肽三醋酸鹽Bradykinin acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) α-促激素,素皮質(zhì)素α-MSH質(zhì)量規(guī)格：>95%
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7內(nèi)皮素-1，人，豬Endothelin-1, human,porcine質(zhì)量規(guī)格：>95%
GLC-82細(xì)胞，人 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞,ZA6細(xì)胞 CL-0050Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蛙皮素,胃泌素Bombesin質(zhì)量規(guī)格：>95%
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2活性腸肽VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)質(zhì)量規(guī)格：>95%
加德納菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量：23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質(zhì)量規(guī)格：含氮量：23.50-24.30 %
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
HT-29 人細(xì)胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-酰-L-谷酰，英文名或英文縮寫：Alu-Gln，級別：BR，99%，規(guī)格：5克
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細(xì)胞，幼倉鼠腎細(xì)胞 人細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J5′-CTP，3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR，95%
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：加德納菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
