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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3714 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 雪腐鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】: Fusarium nivalePCR
【貨號(hào)】: BKP3714
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
雪腐鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7 大鼠細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLAcrylylchloride錄化酸25克BR，98%
DH82 狗腎惡性癥細(xì)胞2-基;虧哪啶;鄰基;α-基;2-基氮雜 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq
KLK4 Others Human 人 KLK-4 / Kallikrein-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-MU4-甲基傘形酮100克試劑級(jí)，92%
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19BORICACID硼酸蛋白組學(xué)級(jí)500GRT
TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,3-二甲基巴比土酸NA
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E外消旋5-羥甲基去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋5-羥甲基托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
B16F1細(xì)胞，小鼠色素瘤細(xì)胞 MRC-5(胚肺細(xì)胞) Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
雪腐鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氨基喜樹(shù)堿9-Aminocamptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
A-431細(xì)胞，人表皮癌細(xì)胞 嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹(shù)堿(R)-7-Ethyl Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)7-乙基-喜樹(shù)堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明膠培養(yǎng)基10克RT
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 放現(xiàn)菌速 D cCTINOMYCIND 20-6-0
雜交瘤(B類);C3110D2B2化乙酰膽堿 (培養(yǎng)... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物
BT549細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級(jí)白色粉末RTsigma
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4(葉酸
PCR檢測(cè)試劑盒：
雪腐鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
