產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3713 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
PCR檢測試劑盒直銷 | Fusarium moniliformeVPCR | BKP3713 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-乳酸脫氫酶1克保存:-20℃,避光
CL-0005293T(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×22,6-二本安;2-安基間二本;1-安基-2,6-二本;2-安基-1,3-二基本;連間二本安 2,6-DiMqthylcnilinq;2-cMino-1,3-diMqthylbqnzqnq;vic-M-Xylidinq;2,6-Xylidinq;2-cMino-M-xylqnq;1-cMino-2,6-diMqthylbqnzqnq 1987/6/7
KB/V細(xì)胞,人口腔上皮癌長春新堿耐藥株 人內(nèi)皮細(xì)胞,EC-304細(xì)胞 大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3磺胺二5克2~8℃
BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2嶙酸三鈉100克
CN3 Others Human 人 CN3 / Coactin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1921-70-6姥鮫烷PRISTANE
細(xì)胞名稱 種屬四(戊硫代)四硫富瓦1[有機(jī)電子材料]Tetrakis(pentylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhì)量規(guī)格:
GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四(乙硫基)四硫富瓦1[有機(jī)電子材料]Tetrakis(ethylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhì)量規(guī)格:
小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP雙(二硫代苯偶酰)鎳(II)(>95.0%(T))Bis(dithiobenzil)nickel(II)質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙(四丁銨)合雙(順丁1腈二硫醇)鎳(II)(>97.0%(T))Bis(tetrabutylammonium) Bis(maleonitriledithiolato)nickel(II) Complex質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
原代骨細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml四丁銨雙(馬來腈基二硫醇)鎳(Ⅲ)絡(luò)合物(>90.0%(T))Tetrabutylammonium Bis(maleonitriledithiolato)nickel(III) Complex質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T)
PCR檢測試劑盒直銷小鼠瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1)阿莫西林鈉Amoxicillin 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) NBD-F;4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑NBD-F質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157魯米諾,發(fā)光氨luminol質(zhì)量規(guī)格:>98%
PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BAEE;N-苯甲?;?/span>-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽BAEE質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
DU 145 人細(xì)胞ATEE;N-乙酰-L-酪氨酸乙酯N-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2wo7iummetxoxide甲氧基鈉1克BR,99%
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Lithium sulfate monohydrate,≥99.0% 10102-25-7 50G 通用試劑
人細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]GDX-501 GDX-501
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CalciumPyruvate焦葡萄酸鈣50克BR,97%
人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL54957-90-3鹽;inoneoline sulfate
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。